[发明专利]一种适用于工业生产的1-脱氧野尻霉素的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种1-脱氧野尻霉素的制备方法，尤其涉及一种适用于工业生产的1-脱氧野尻霉素的制备方法。

背景技术

桑叶，别名铁扇子，是桑科植物桑（Morus alba L.）的干燥叶，在我国分布较广并大量种植，长期以来，桑叶主要应用于两个方面，一是桑蚕的饲养，一是入中药，被认为具有疏散风热、清肝明目、凉血止血、清肺润燥等功效。作为一种卫生部批准的药食两用的植物，随着研究的深入，表明桑叶中含有黄酮类、生物碱类、氨基酸、维生素以及矿物质等活性物质，其中一种哌啶类生物碱1-脱氧野尻霉素（DNJ）被广泛关注，被证实具有明显的降血糖功效，现代药理学发现1-脱氧野尻霉素降血糖的机理主要是其能够作为多种α-糖苷酶的抑制剂，可以阻止淀粉等多糖分解成葡萄糖或其他单糖。相对于其他药物，1-脱氧野尻霉素具有安全性高、依赖性小等特点，倍受青睐，将有望取代传统降血糖药物。

目前，关于从桑叶中提取1-脱氧野尻霉素（DNJ）的方法较多，如申请号为200710067498.3的中国专利申请公开了一种从桑叶中提取1-脱氧野尻霉素的方法，该方法是将桑叶粉碎后进行提取、无机酸进行酸化，然后过阳离子交换树脂，氨醇洗脱，经浓缩干燥，得含量为10%以上的DNJ产品，其工艺虽简单，但过阳离子交换树脂，损失较大；申请号为201210190238.6中国专利申请公开了一种利用滤膜和树脂制备桑叶1-脱氧野尻霉素提取物的方法，该方法是将桑叶进行提取、浓缩、微孔过滤、经有机超滤膜过滤后，然后过大孔吸附树脂以及阳、阴离子交换树脂，最后浓缩、干燥得产品，产品纯度可达50%以上，该方法的缺陷是工艺繁琐、过程复杂，设备投入大，不利工业生产；申请号为201210411230.8的中国专利申请公开了一种从桑叶中提取制备1-脱氧野尻霉素的工艺方法，该方法是将药材粉碎后进行提取、醇沉过滤，然后依次过大孔树脂、阳离子交换树脂，经浓缩、硅胶吸附、解吸以及干燥可得DNJ纯度70%以上产品，该方法存在工艺复杂，收率低，成本高等缺陷。

就上述方法而言，大多为致力于提高1-脱氧野尻霉素的纯度，对于生产的实际操作与成本控制方面关注不够，所以，现有真正适用于工厂生产的技术较少。

发明内容

本方法所要解决的技术问题是，提供一种以干燥桑叶为原料的适用于工业生产的1-脱氧野尻霉素的制备方法，该方法可实现很大程度地降低溶剂损耗量、降低能耗、提高产品收率，最终制备出低成本的含量12%以上的1-脱氧野尻霉素产品。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：一种适用于工业生产的1-脱氧野尻霉素的制备方法，包括以下步骤：

（1）原料前处理：将干燥原料桑叶粉碎至20-40目，得粉料；

（2）酶解：向步骤（1）所得的粉料中加入干燥原料重量6-10倍的水，升温至40-50℃，然后加入干燥原料重量的0.05-0.20%的组合酶，酶解3-5h，过滤，得滤渣；

（3）连续组合提取：将步骤（2）所得的滤渣使用3-4个提取装置连续组合提取，每个提取装置中的滤渣提取3-4次，每次提取所用溶剂为干燥原料重量6-9倍的亲水溶剂，提取温度为70-90℃，提取时间为1.8-2.2h，提取后，合并提取液，过滤；

所述亲水溶剂为含酸性溶液的亲水溶剂，所述酸性溶液的体积分数为0.2-0.4%；

（4）醇沉、离心：将经步骤（3）过滤后的提取液进行减压浓缩，浓缩至原体积的1/3-1/2，冷却至20-30℃，用质量分数为1-2%的碱液调节pH至8-9，然后加入相当于调节pH值后浓缩液重量3-4倍的醇溶液，搅拌10-15min后，静置3-4h，管式离心，离心速率为10000-14000r/min，得离心液；

（5）膜滤：将步骤（4）所得的离心液常温下在压力为25-35bar条件下，使用孔径为5-10kDa的有机超滤膜进行超滤处理，得超滤透过液，然后常温下在压力为0.5-1.5MPa条件下，使用孔径为300-800Da（道尔顿）的纳滤膜进行纳滤处理，得纳滤透过液；

（6）浓缩：将步骤（5）所得的纳滤透过液进行减压浓缩，浓缩至原体积的1/4-1/6，得浓缩液；

（7）干燥：将步骤（6）所得的浓缩液进行干燥后，即得产品。

进一步，步骤（2）中，加入的组合酶为纤维素酶与果胶酶，其中纤维素酶:果胶酶=2-4:1，w/w。

进一步，步骤（3）中，所述亲水溶剂为甲醇或乙醇，所述酸性溶液为质量分数37.5%的盐酸、质量分数98%的硫酸或甲酸。