[发明专利]二酮哌嗪类化合物及其制备方法和用途

权利要求书

1.一种二酮哌嗪类化合物，其特征在于：其结构有两个苯丙氨酸缩合而成，并有苯环部分双键的水解和乙酰化，具体结构如化合物1和2所示，

（1）化合物1

  

Cladosporin A (1)

（2）化合物2

            Cladosporin B (2)     。

2.一种权利要求1所述的二酮哌嗪类化合物的制备方法，其特征在于具体包括如下步骤：

（1）发酵生产

将球孢枝孢菌（Cladosporiumsphaerospermum，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号是：CCTCC NO： M 2014098）划线接种到含有2216-E固体培养基的平板上，于28℃培养箱中培养活化1天后，将活化的单克隆菌落接种到装有2216-E液体培养基的装液量为40%的三角锥形瓶中发酵培养，在温度为28℃，摇床转速为150 r/min的条件下发酵8天，获取发酵液；

（2）浸膏的获得

将发酵液用离心机离心去除菌体，获取发酵上清液，然后用活化的大孔树脂吸附过滤发酵上清液，接着用80%乙醇对其洗脱，最后用旋转蒸发仪蒸干洗脱液，获取粗浸膏；

（3）化合物的分离精制

a.将正己烷、乙酸乙酯、甲醇和纯水按体积比1:1:1:1的比例混合后作为高速逆流色谱仪（HSCCC）的第一两相体系，将正己烷、乙酸乙酯、甲醇和纯水按体积比2：1：2：1的比例混合后作为高速逆流色谱仪（HSCCC）的第二两相体系；

b.取300毫克粗浸膏溶于6毫升第一两相体系中，离心获取上清液，然后在HSCCC梯度洗脱模式下先在第一两相体系的下相的洗脱下获取化合物1 (14.3 毫克)，接着在第二两相体系的下相的洗脱下获取化合物2 (25.4 毫克)，化合物结构如下所示，（1）化合物1

  

Cladosporin A (1)

（2）化合物2

        Cladosporin B (2)。

3.根据权利要求2所述的一种二酮哌嗪类化合物的制备方法，其特征在于：所述的2216-E固体培养基的配制方法如下：将蛋白胨0.5g，酵母膏0.1g，硫酸铁0.01g，固体琼脂2g，溶于100ml海水中，调PH值至7.2。

4.根据权利要求2所述的一种二酮哌嗪类化合物的制备方法，其特征在于：所述的2216-E液体培养基的配制方法如下：将蛋白胨5g，酵母膏1g，硫酸铁0.1g，溶于1000ml海水中，调PH值至7.2。

5.权利要求1所述的二酮哌嗪类化合物1、2在制备抗肿瘤药物中的用途。

6.根据权利要求5所述的用途，其特征在于：所述的抗肿瘤药物是指所述的酮哌嗪类化合物1、2在制备抑制肿瘤细胞增殖抑制剂或肿瘤细胞杀伤剂中的用途。