[发明专利]二酮哌嗪类化合物及其制备方法和用途

说明书

技术领域

本发明涉及一种二酮哌嗪类化合物，尤其是涉及一种用球孢枝孢菌制备二酮哌嗪类化合物的方法以及该类化合物在制备细胞增殖抑制剂或抗肿瘤剂中的用途。 

背景技术

二酮哌嗪类化合物(Diketopiperazines，DKPs)的基本结构是由2个氨基酸缩合而成的环二肽(DKP)，因其骨架具有稳定的六元环结构，且有2个氢键给体和2个氢键受体，使得DKPs在药物化学中成为一个重要的药效团，且它们的研究也为多肽化学方向研究奠定了基础。目前已经发现许多有活性的DKP。如Ambewelamide A、Ambewelamide B、phenylahistin和verticillin A具有抗肿瘤活性(参见文献如Chu M，Truumees I，Rothofsky ML，Patel MG，Gentile F，Das PR，Puar MS，Lin SL(1995)Inhibition of c-fos proto-oncogene induction by Sch52900and Sch52901，novel diketopiperazines produced by Gliocladium sp.J Antibiot(Tokyo)48：1440-1445；如Kanoh K，Kohno S，Katada J，Hayashi Y，Muramatsu M，Uno I(1999a)Antitumor activity of phenylahistin in vitro and in vivo.Biosci Biotechnol Biochem63：1130-1133；Kanoh K，Kohno S，Katada J，Takahashi J，Uno I(1999b)(-)-等；)Gliotoxin和sirodesmin PL具有抗菌、抗病毒和免疫抑制活性(参见文献如Sutton P，Newcombe NR，Waring P，Müllbacher A(1994)In vivo immunosuppressive activity of gliotoxin，a metabolite produced by human pathogenic fungi.Infect Immun62：1192-1198；如Sutton P，Waring P，Mü llbacher A(1996)Exacerbation of invasive aspergillosis by the immunosuppressive fungal metabolite，gliotoxin.Immunol Cell Biol74：318-322；Waring P，Beaver J(1996)Gliotoxin and related epipolythiodioxopiperazines.Gen Pharmacol27：1311-1316)等。 

该类化合物是一类较常见的真菌代谢产物，其结构特点是都是有两个氨基酸酰胺化环合衍生而得。本发明人研究发现球孢枝孢菌Cladosporiumsphaerospermum液体发酵产物经超声破碎后的粗提物有很好的细胞坏死活性，遂对其活性成分进行了研究，结果发现了三个含硫二酮哌嗪类化合物具有抗肿瘤活性，目前尚未见对该化合物的化学结构及细胞增殖抑制活性的报道，因此市场上也尚未见有与此相关的药物。 

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种结构独特的具有细胞增殖抑制以及直接杀伤癌细胞等抗肿瘤活性的二酮哌嗪类化合物及其制备方法和用途。 

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：一种二酮哌嗪类化合物，其结构有 两个苯丙氨酸缩合而成，并有苯环部分双键的水解和乙酰化，具体结构如化合物1和2所示， 

(1)化合物1 

(2)化合物2 

一种二酮哌嗪类化合物的制备方法，具体包括如下步骤： 

(1)发酵生产 

将球孢枝孢菌(Cladosporiumsphaerospermum，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号是：CCTCC NO：M2014098)划线接种到含有2216-E固体培养基的平板上，于28℃培养箱中培养活化1天后，将活化的单克隆菌落接种到装有2216-E液体培养基的装液量为40％的三角锥形瓶中发酵培养，在温度为28℃，摇床转速为150r/min的条件下发酵8天，获取发酵液； 

(2)浸膏的获得