[发明专利]利用超声波及酶解技术制备鹿血血红素方法无效
申请号: | 201410243653.2 | 申请日: | 2014-06-04 |
公开(公告)号: | CN104098579A | 公开(公告)日: | 2014-10-15 |
发明(设计)人: | 王帅;刘维斌 | 申请(专利权)人: | 黑龙江省野生动物研究所 |
主分类号: | C07D487/22 | 分类号: | C07D487/22 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 150081 黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 利用 超声 波及 技术 制备 鹿血 血红素 方法 | ||
1.利用超声波及酶解技术制备鹿血血红素方法,其特征在于所述方法步骤如下:
(1)新鲜鹿血中加入1%的抗凝血剂柠檬酸三钠溶液,搅拌均匀、得到新鲜抗凝鹿血。取100mL抗凝血于离心管中,以4500r·min-1转速离心25min,倾出上清液(血清)收集红血球后,盐水洗3次,得到干净的红血球。加入是红血球体积2倍的去离子水,用电动搅拌机搅拌30min,红血球吸水胀裂,血红蛋白从红细胞中分离出来,过滤出纤维,滤液备用。
(2)将备用的V血红细胞与V水按照1∶1~1∶9的浓度配置,在100~300w功率的超声波设备进行破碎,破碎0~30min。
(3)添加碱性蛋白酶,加入底物浓度为2000μ/g~6000μ/g,pH为7.5~9,调整温度为40~60℃,酶解时间30~150min。
(4)分离,冷冻干燥,得到产品。
2.根据权利要求1所述的利用超声波及酶解技术制备鹿血血红素方法,其特征在于步骤(2)中所述的V血红细胞与V水按照1∶5浓度配置。
3.根据权利要求1所述的利用超声波及酶解技术制备鹿血血红素方法,其特征在于步骤(2)中所述超声波设备功率为200W。
4.根据权利要求1所述的利用超声波及酶解技术制备鹿血血红素方法,其特征在于步骤(2)中所述破碎时间为10min。
5.根据权利要求1所述的利用超声波及酶解技术制备鹿血血红素方法,其特征在于步骤(2)血红细胞的浓度V血红细胞:V水近似于1∶5,超声破碎功率185W,破碎时间为9min。
6.根据权利要求1所述的利用超声波及酶解技术制备鹿血血红素方法,其特征在于步骤(3)中所述碱性蛋白酶的酶添加量(E/S)5000U/g。
7.根据权利要求1所述的利用超声波及酶解技术制备鹿血血红素方法,其特征在于步骤(3)中所述碱性蛋白酶所需pH值为8.5。
8.根据权利要求1所述的利用超声波及酶解技术制备鹿血血红素方法,其特征在于步骤(3)中所述碱性蛋白酶所需水解时间120min。
9.根据权利要求1所述的利用超声波及酶解技术制备鹿血血红素方法,其特征在于步骤(3)中所述碱性蛋白酶所需水解温度50℃。
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