[发明专利]一种基于衍生的人参皂苷及其苷元的检测分析方法

权利要求书

1.一种基于衍生的人参皂苷及其苷元的检测分析方法，其特征在于，包括以下步骤：

a向人参皂苷及其苷元的萃取物中加入4’-羧基罗丹明， 2-氯-1-甲基碘代吡啶和4-二甲氨基吡啶，乙腈，摇匀，置于水浴中加热，4’-羧基罗丹明与人参皂苷及其苷元上的游离羟基进行衍生化反应，得到衍生化产物； 

b将a中的衍生化产物经滤膜过滤后利用超高效液相色谱串联质谱法进行分析检测；

所述的人参皂苷及其苷元在C-20或C-3位置具有游离羟基。

2.根据权利要求1所述的检测分析方法，其特征在于：所述的人身皂苷为原人参二醇型人参皂苷或原人参三醇型人参皂苷，所述的原人参二醇型人参皂苷为Rg3、 Rh2、Rs3或Compound K，所述的原人参三醇型人参皂苷为Re、Rf、 Rg1、Rg2、Rh1或F1，所述的苷元为原人参二醇型人参皂苷苷元或原人参三醇型人参皂苷苷元，所述的原人参二醇型人参皂苷苷元为原人参二醇或人参二醇，所述的原人参三醇型人参皂苷苷元为原人参三醇或人参三醇。

3.根据权利要求1所述的检测分析方法，其特征在于：步骤a中人参皂苷及其苷元的萃取物的制备方法为超声辅助-分散液液微萃取：将人参皂苷及其苷元的水溶液加入到离心管中，去离子水定容，再加入萃取剂和分散剂，超声处理形成均匀的乳浊液体系后，离心，去除上清液得到沉积相，沉积相用氮气吹干后，溶于乙腈，制得人参皂苷及其苷元的萃取物。

4.根据权利要求3所述的检测分析方法，其特征在于：萃取剂选自二氯甲烷、三氯甲烷、三氯乙烯、四氯乙烯或氯苯；分散剂选自丙酮、乙腈、甲醇或乙醇。

5.根据权利要求1所述的检测分析方法，其特征在于：步骤a中的衍生化反应为置于25-60 °C水浴中加热10-60分钟。

6.根据权利要求1所述的检测分析方法，其特征在于：步骤a中4’-羧基罗丹明的摩尔浓度为人参皂苷及其苷元萃取物摩尔浓度的5-15倍，2-氯-1-甲基碘代吡啶的摩尔浓度为4’-羧基罗丹明摩尔浓度的500-10000倍，4-二甲氨基吡啶的摩尔浓度为4’-羧基罗丹明摩尔浓度100-1000倍。

7.根据权利要求6所述的检测分析方法，其特征在于：4’-羧基罗丹明的摩尔浓度为人参皂苷及其苷元萃取物摩尔浓度的10倍，2-氯-1-甲基碘代吡啶的摩尔浓度为4’-羧基罗丹明摩尔浓度的7000倍，4-二甲氨基吡啶的摩尔浓度为4’-羧基罗丹明摩尔浓度的500倍。

8.根据权利要求1所述的检测分析方法，其特征在于：步骤b中超高效液相色谱中的色谱分离柱为SB C18柱，采用流动相线性梯度洗脱法，进样体积为2 μL，柱温恒定在30℃。

9.根据权利要求8所述的检测分析方法，其特征在于：流动相由流动相A和流动相B组成，流动相A为5%体积分数的乙腈/水溶液含有0.1%甲酸，流动相B为乙腈含有0.1%甲酸；0分钟时，流动相A与流动相B的体积比为60:40；5 min时，流动相A与流动相B的体积比为35:65。

10.根据权利要求1所述的检测分析方法，其特征在于：步骤b中质谱法为利用三重四级杆质谱法，质谱条件为：干燥气温度300 °C，流速10 L/min，喷雾器气压40 psi，鞘气温度280 °C，流速11 L/min，毛细管电压3.5 kV。