[发明专利]一套适合评价土壤中农药残留毒性变化的方法

权利要求书

1.一套评价土壤中农药残留毒性变化的方法，其特征在于是根据土壤中残留农药的性质不同而采取不同的提取步骤：

1)当土壤中残留农药及其降解产物以脂溶性农药占主导时，采取有机溶剂提取方法：

a提取农药残留物：取20g试验土样用石油醚∶丙酮体积比为1∶1的石油醚丙酮混合液120mL，在索氏提取器中先浸泡12h后75℃抽提6h，提取液浓缩至1mL得到土壤提取液；

b验证农药残留物的基因毒性：将土壤提取液均匀滴加到中性滤纸上，待石油醚丙酮混合液挥发后，吸取2ml的去离子水滴至中性滤纸，将3条蚯蚓放到中性滤纸上染毒12h，后将蚯蚓使用彗星实验检测试验土样中农药残留物；

c验证农药残留物的生态毒性：选取初始根生长良好、根长度一致的蚕豆种子，放入土壤提取液中，让土壤提取液液体浸泡住蚕豆种子根尖染毒5h；待土壤提取液挥发后，将染毒5h后的蚕豆种子使用微核实验检测试验土样中农药残留物的生态毒性；

2)当土壤中残留农药及其降解产物的性质以水溶性农药占主导时，采取去离子水提取方法：

a提取农药残留物：取20g试验土样，按照水：土壤体积比为1:2.5加入50mL去离子水，振荡6h，然后在5000rpm/min条件下离心5min，取上清液，得到土壤提取液；

b验证农药残留物的基因毒性：取2mL土壤提取液，均匀滴加到中性滤纸上；将3条蚯蚓放到中性滤纸上染毒12h；将染毒12h后的蚯蚓使用彗星实验检测试验土样中农药残留物；

c验证农药残留物的生态毒性：选取初始根生长良好、根长度较一致的蚕豆种子，放入土壤提取液中，让土壤提取液浸泡住根尖染毒5h；将染毒5h后的蚕豆种子使用微核实验检测试验土样中农药残留物；

3)当土壤中残留的脂溶性农药与水溶性农药比例接近或不清楚土壤中哪类性质的农药占主导时，采取泥浆直接暴露染毒法：

取100g试验土样，加入30mL去离子水，混合均匀后放入三只蚯蚓，蚯蚓暴露染毒48h；染毒结束将蚯蚓取出，放在用4℃生理盐水浸湿的滤纸上饥饿清肠12h，使其吐去肠内杂物；将该蚯蚓使用彗星试验检测试验土样中农药残留物的基因毒性。