[发明专利]SelK基因表达水平的荧光定量PCR检测试剂盒及方法有效
| 申请号： | 201410830420.2 | 申请日： | 2014-12-26 |
| 公开（公告）号： | CN104561288A | 公开（公告）日： | 2015-04-29 |
| 发明（设计）人： | 张仁利;李瑞敏 | 申请（专利权）人： | 深圳市疾病预防控制中心 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 深圳中一专利商标事务所 44237 | 代理人： | 张全文 |
| 地址： | 518000 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | selk 基因 表达 水平 荧光 定量 pcr 检测 试剂盒 方法 | ||
1.一种SelK基因表达水平的荧光定量PCR检测试剂盒，其特征在于，包括特异性引物和荧光探针；其中，
所述特异性引物包括具有序列表SEQ.ID.No.1碱基序列的上游引物F和具有序列表SEQ.ID.No.2碱基序列的下游引物R；
所述荧光探针具有序列表SEQ.ID.No.3碱基序列，且5’端标记有可淬灭的报告基团，3’标记有BHQ荧光基团。
2.如权利要求1所述的SelK基因表达水平的荧光定量PCR检测试剂盒，其特征在于，所述可淬灭的报告基团为FAM、HEX、TAMRA、ROX中的一种。
3.如权利要求1或2所述的SelK基因表达水平的荧光定量PCR检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括有阳性对照；所述阳性对照为人cDNA模板。
4.如权利要求1或2所述的SelK基因表达水平的荧光定量PCR检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括有阴性对照；所述阴性对照为RNase free dH2O。
5.一种SelK基因表达水平的荧光定量PCR检测方法，其特征在于，包括如下步骤：
提取待测样本RNA；
将所述待测样本RNA进行反转录，得到反转录DNA；
以所述反转录DNA为模板，进行实时荧光PCR；
检测PCR过程中的荧光信号；
其中，所述实时荧光PCR过程中采用的引物包括具有序列表SEQ.ID.No.1碱基序列的上游引物F和具有序列表SEQ.ID.No.2碱基序列的下游引物R；
所述实时荧光PCR过程中采用的荧光探针具有序列表SEQ.ID.No.3碱基序列，且5’端标记有可淬灭的报告基团，3’标记有BHQ荧光基团。
6.如权利要求5所述的SelK基因表达水平的荧光定量PCR检测方法，其特征在于，所述可淬灭的报告基团为FAM。
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