[发明专利]用作抗菌产品的Garvicin A

说明书

技术领域

GarvicinA的特异性较高，抗菌活性较大，使其在水产养殖和食品工业中均具有潜在的应用，能为人类和/或易感染动物抑制致病格氏乳球菌菌株的生长。

当用在水产养殖中时，GarvicinA的特异性保证它的应用不会影响鱼的肠道微生物区系，也不会干扰与其同时应用的乳酸杆菌等益生菌的细菌的活性。

当用在食品中时，这种细菌素的应用能防止食品被格氏乳球菌的致病菌株污染，这种致病菌株污染会参与人类临床病例的形成，但不会抑制食品感官特性和加工中涉及的其他乳酸菌的生长。

背景技术

鳟鱼中的乳球菌病的病因是格氏乳球菌，这种病对地中海国家的水产养殖具有重大的经济和公共卫生意义。西班牙是欧盟中产鳟鱼的主要国家之一，产量第一，产值第五(海水养殖生产者企业协会报告，2008年)。乳球菌病能对鳟鱼产生致命性(50％)，减慢其生长速率，并使受感染的鱼无法销售，因此大大影响了鳟鱼的产量(Vendrell等人，2006年)。受格氏乳球菌感染的其他鱼种如鳗鱼、黄尾鱼和鲶鱼。另外，格氏乳球菌还会传染其他动物种属和人类，因此被视为是一种动物源性传染病。格氏乳球菌是使家牛和野牛产生乳腺炎(Teixeira等人，1996年)和使猪形成肺炎变化过程的原因(Weaver等人，2011年)。人们还常常从乳制品(手工奶酪和工匠奶酪)、猪肉和鸡肉及蔬菜中分离出格氏乳球菌(Santos等人，2005年；Kawanishi等人，2007年；Foschino等热，2008年)。在人类中，格氏乳球菌偶然会引发不同的临床过程(Fefer等人，1998年；Wang，2007年)。

在鳟鱼中，乳球菌病是一种具有明显季节性的全身性败血症。乳球菌病与劣质水中易发生水温升高有关(Ghittino和Muzquiz，1998年；Vendrell等人，2006年)，并且能引发较高的死亡率(产量的50-80％)。应该注意的是，格氏乳球菌能在水中存在很长时间而不失去存活能力，因而能在设施中维持感染和传播力(Vendrell等人，2006年)。治疗这种疾病需要服用抗生素，但是抗生素应用困难且昂贵，并且在很多情况下，由于越来越多地出现多重耐药格氏乳球菌菌株而不起作用。目前，对抗乳球菌病的预防措施是使用疫苗和益生菌(Vendrell，2007年和2008年)。但是，虽然商品级疫苗有效，但价格昂贵，需要对鱼进行紧张而又复杂的处理工作。而且，虽然益生菌能刺激鱼产生免疫反应，但尚未显示能对格氏乳球菌的感染完全有效。

细菌素是由各种细菌合成的抗菌肽，它们具有抑制类似细菌或产菌的同种其他菌株生长的能力。目前，乳酸乳球菌产生的一种细菌素乳“酸乳球菌素”在食品工业(Delves-Broughton，1990年)，特别是预防奶酪和各种肉类(生肉和熟肉)可能发生变化，中用作防腐剂，对梭状芽孢杆菌、单核细胞增生李斯特菌、多种乳酸菌等多种革兰氏阳性菌显示出有效性。

至今，仅描述了格氏乳球菌产生的三种细菌素：GarviecinL1-5(Villani等人，2001年)，GarvicinML(Borrero等人，2011年)和GarvieacinQ(Tosukhowong等人，2012年)。所有这些细菌素能或多或少地抑制格氏乳球菌和屎肠球菌、单核细胞增生李斯特菌、伊氏李斯特菌、片球菌、干酪乳杆菌、清酒乳杆菌、丙酸杆菌、梭状芽孢杆菌、乳酸乳球菌、肺炎链球菌等其他革兰氏阳性菌的生长。

发明内容

用作抗菌产品的GarvicinA。

本发明涉及一种含至少一种称为GarvicinA的肽的产品，所述肽具有抗菌活性并包含用SEQIDNO:1描述的氨基酸序列，假定构成所述肽的氨基酸由D或L同分异构体独立选择得到。

另外，本发明涉及包含至少22个氨基酸的所述肽的片段及其与SEQIDNO:1氨基酸序列有至少55％一致性的衍生物的制剂，包括至少一个糖基化、一个酰胺化、一个酰化、一个乙酰化、一个甲基化或携带保护基，其中所述片段和衍生物呈现抗菌活性。

本发明的另一方面涉及一种含多肽的产品，所述多肽包括前面两段中所述的肽。

本发明另一方面涉及一种具有能编码前面段落所述的一种肽或多肽的核苷酸序列的多核苷酸，本发明更深一方面还称为能编码在此所述的肽或多肽的核酸结构，其中所述核酸与一个或多个控制序列结合，所述控制序列在适当的宿主中指导所述肽的产生，并且，也包含相同物质，重组表达载体、含所述核酸结构的细胞或宿主机体。