[发明专利]利用黑曲霉全细胞转化生产表没食子儿茶素和没食子酸的方法

权利要求书

1.一种利用黑曲霉全细胞转化生产表没食子儿茶素和没食子酸的方法，其特征在于，采用黑曲霉(Aspergillus niger)RAF106菌株进行全细胞生物转化，全细胞生物转化的营养液为含有茶多酚或EGCG质量百分含量1～20％的营养液。

2.根据权利要求1所述的利用黑曲霉全细胞转化生产表没食子儿茶素和没食子酸的方法，其特征在于，所述的黑曲霉(Aspergillus niger)RAF106菌株，保藏日期为2014年8月27日，保藏编号为CGMCC NO.9608，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)；保藏单位地址为中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号。

3.根据权利要求1所述的利用黑曲霉全细胞转化生产表没食子儿茶素和没食子酸的方法，其特征在于，所述的黑曲霉(Aspergillus niger)RAF106菌株应用种子培养基进行种子培养，获得黑曲霉RAF106菌株的种子分生孢子；

所述的种子培养基配方为：马铃薯200g，蔗糖20g，琼脂20g，蒸馏水1000mL，pH自然，121℃灭菌20min。

4.根据权利要求3所述的利用黑曲霉全细胞转化生产表没食子儿茶素和没食子酸的方法，其特征在于，所述的种子培养的条件为：茄子瓶静置培养，培养温度28℃～35℃，培养时间3～5d。

5.根据权利要求3所述的利用黑曲霉全细胞转化生产表没食子儿茶素和没食子酸的方法，其特征在于，在所述的种子培养过程中，黑曲霉RAF106菌株的种子菌接种量为每毫升全细胞生物转化的营养液接种10²～10⁸个黑曲霉RAF106菌株分生孢子。

6.根据权利要求3所述的利用黑曲霉全细胞转化生产表没食子儿茶素和没食子酸的方法，其特征在于，所述的黑曲霉RAF106菌株的种子分生孢子的获取方法为：采用无菌生理盐水冲洗长满黑色黑曲霉分生孢子的茄子瓶，并以接种环轻轻刮取种子培养基表面，得到黑曲霉分生孢子悬浮液。

7.根据权利要求1所述的利用黑曲霉全细胞转化生产表没食子儿茶素和没食子酸的方法，其特征在于，所述的全细胞生物转化为液态转化。

8.根据权利要求1所述的利用黑曲霉全细胞转化生产表没食子儿茶素和没食子酸的方法，其特征在于，所述的全细胞生物转化的营养液的配方为含有如下组分质量百分含量的水溶液：茶多酚或EGCG 1～20％，磷酸氢二钾0.03～0.8％，磷酸二氢钾0.1～3％，硫酸锰0.03～0.7％，氯化钠0.3～2％，硫酸镁0.01～0.3％，酵母或麦芽提取物0.02～2％；121℃灭菌30min。

9.根据权利要求1所述的利用黑曲霉全细胞转化生产表没食子儿茶素和没食子酸的方法，其特征在于，所述的全细胞生物转化的条件为：温度25～42℃，摇床转速160～220r/min，时间20～60h。