[发明专利]模拟移动色谱分离法制乳清蛋白抗氧化肽

权利要求书

1.模拟移动色谱分离法制乳清蛋白抗氧化肽，其操作步骤如下：

a、预处理：将1份乳清蛋白粉与10～35份水混合，在95℃下恒温5min后，降温至45℃～60℃，用NaOH溶液调节溶液pH至7.0～8.5，制成乳清蛋白溶液；

b、酶解：在a步骤制得的乳清蛋白溶液中加入碱性蛋白酶0.005～0.02份，同时用NaOH溶液维持系统的pH为7.0～8.5，在45℃～60℃的条件下搅拌2.0～6.0h后，再加入胰蛋白酶0.005～0.02份，仍维持反应液pH为7.0～8.5，在45℃～60℃的条件下搅拌1.0h～3.0h，然后升温至85℃～100℃，保持10min～15min，制得乳清蛋白酶解液；

c、分离：去除b步骤制得的乳清蛋白酶解液中的固体物质，收集酶解液中分子量小于1000Da的滤液，制得粗乳清蛋白肽；

d、纯化：将粗乳清蛋白肽用水调制成混合液、其质量百分比浓度为5%～25%，用模拟移动床连续吸附进行分离纯化，然后将吸附液进行喷雾干燥，即制得乳清蛋白抗氧化肽；

以上均为质量份数。

2.如权利要求1所述的模拟移动色谱分离法制乳清蛋白抗氧化肽，作为进一步优化，其操作步骤如下：

a、预处理：将1份乳清蛋白粉与20～30份水混合，在95℃下保持5min后，降温至45℃～60℃，用NaOH溶液调节溶液pH至7.0～8.5，制成乳清蛋白溶液；

b、酶解：在a步骤制得的乳清蛋白溶液中加入碱性蛋白酶0.01～0.015份，同时NaOH溶液维持系统的pH为7.0～8.5，在45℃～60℃的条件下搅拌3.0～5.0h后，再加入胰蛋白酶0.01～0.015份，仍维持反应液pH为7.0～8.5，在45℃～60℃的条件下搅拌2.0h～3.0h，然后升温至85℃～100℃，保持10min～15min，制得乳清蛋白酶解液；

     c、分离：去除b步骤制得的乳清蛋白酶解液中的固体物质，收集酶解液中分子量小于1000Da的滤液，制得粗乳清蛋白肽；

     d、纯化：将粗乳清蛋白肽用水调制成混合液、其质量百分比浓度为5%～25%，用模拟移动床连续吸附进行分离纯化，然后将吸附液进行喷雾干燥，即制得乳清蛋白抗氧化肽；

     以上均为质量份数。

3.如权利要求1所述的模拟移动色谱分离法制乳清蛋白抗氧化肽，其特征在于所述的模拟移动床连续吸附分离，其吸附剂为大孔吸附树脂、吸附原料为粗乳清蛋白肽用水调制成混合液、其控制流量为15～20BV/h；解析剂为乙醇溶液、其质量百分浓度为90%、其控制流量为20～30BV/h；冲洗剂为去离子水、其控制流量为15～25BV/h；吸附树脂的再生剂是NaOH溶液、其质量百分浓度为2%～4%、其控制流量为3～9BV/h；全程切换时间为300～700s、温度控制在25～60℃、压力控制为0.3～1.0MPa。

4.如权利要求1所述的模拟移动色谱分离法制乳清蛋白抗氧化肽，其特征在于所述乳清蛋白为食品级。

5.如权利要求1所述的模拟移动色谱分离法制乳清蛋白抗氧化肽，其特征在于所述的大孔吸附树脂为XAD16N吸附树脂、XAD18吸附树脂或XAD1600N吸附树脂。