[发明专利]一种具有低致敏性的高蛋白牡蛎活性肽制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种肽的制备方法，尤其涉及一种具有低致敏性的高蛋白牡蛎活性肽制备方法，可应用于功能食品和营养保健制品，属生物技术领域。

背景技术

自1975年Hughes等报道从动物组织中发现了具有类吗啡活性的小肽以来，人们已经从动、植物和微生物中分离出多种多样的生物活性肽，并且已经有研究证明，经酶解天然来源蛋白原料后得到的各种生物活性肽类制品不仅更易于人体吸收，而且其特有的结构和性质通常能表现出抗氧化、抗疲劳、降血脂、降血压、增强免疫力等一系列生理功能，对天然来源的蛋白实施酶解制备生物活性肽，还具有原料来源广泛、无毒副作用、可规模化生产、价格便宜等优点。

牡蛎是我国四大经济水产之一，蕴含丰富的蛋白质、多肽、多糖和功能氨基酸等生理活性物质,以及多种人体必需的维生素、矿物质，具有很高的营养价值。近年诸多以牡蛎为原材料进行的活性肽研究屡见报道，然而这些报道中多中存在活性肽产率低，制备过程复杂等问题。并且由于鱼类、甲壳类、贝类、头足类等水产动物普遍存在致敏问题，如何在制备牡蛎活性肽的过程中降低其致敏性，同时能最大程度保留活性肽的生理活性、提高牡蛎活性肽的产率，成为有待解决的问题。

发明内容

本发明的目的是提供一种具有低致敏性的高蛋白牡蛎活性肽制备方法，以拓宽牡蛎蛋白的加工和利用途径，同时得到具有保健功效的牡蛎活性肽，并可应用于工业化方法。

本发明还提供了一种具有低致敏性的高蛋白牡蛎活性肽，所述牡蛎活性肽通过以上方法制得，所述牡蛎活性肽的抗原性较牡蛎蛋白降低80％以上，牡蛎活性肽中总蛋白含量达到了80％以上，肽含量达到70％以上，分子量小于1000Da的组分占90％以上。

本发明提供的一种具有低致敏性的高蛋白牡蛎活性肽制备方法，包括

1)将牡蛎去壳清洗后，加水碾磨成牡蛎浆，去壳牡蛎与水的重量比为1:1-5；

2)在所述牡蛎浆中加入柠檬酸调整pH至3-7，然后在20℃-50℃条件下搅拌该牡蛎浆1-5小时，离心去上清液，得到牡蛎渣料；

3)将该牡蛎渣料以1-5:1的水渣比加水混合、搅拌，调pH至7-9，加热至30℃-60℃，按每克牡蛎渣料加入10-100U的风味蛋白酶和10-100U的木瓜蛋白酶，酶解2-6小时，最后将酶解液加热灭酶，收取酶解液，经后处理成为所述活性肽。

本发明采用了磨浆、水洗处理与酶解相结合的工艺，对牡蛎蛋白进行酶解，最终得到具有生物活性的牡蛎肽，本发明称为“牡蛎活性肽”。可以根据需要对酶解产物实施适当的加工纯化，得到相关形态的牡蛎活性肽产品，例如液态或粉体等。

根据本发明的一个实施方案，还包括以下制备牡蛎活性肽粉的步骤：

1)对所得到的酶解液进行离心，转速12000-16000r/min，留用离心清液，用孔径0.05-0.2μm的膜过滤设备进行过滤，条件为压力0.2-0.4MPa，温度30-80℃，制得牡蛎活性肽透过液；

2)将上述牡蛎活性肽透过液进行蒸发浓缩，直到浓缩液的固含量为20-50％，条件为蒸汽压0.1±0.02MPa，温度40-80℃，按照浓缩液总固含量10％-30％的比例加入活性炭粉进行脱色，并过滤、灭菌；

3)用离心喷雾干燥器将上述脱色后的浓缩液进行干燥处理，条件为进口温度140-160℃，出口温度80-90℃，制成牡蛎活性肽粉。

根据本发明的方法，首先要求对作为原料的牡蛎蛋白粉实施磨浆、水洗目的是以除去原料中的糖类和其他非蛋白物质，提供作为用于酶解制取牡蛎活性肽的原料(酶解底物)。

对磨浆、水洗处理后的料液进行固液分离(例如离心分离)并收取渣料，渣料作为酶解底物。

本发明采用的酶解过程包括了对磨浆、水洗处理的料液进行风味蛋白酶和木瓜蛋白酶的酶解，而所使用的酶制剂均可来自市售产品，并按照其要求的酶解条件实施即可，例如，在所使用酶制剂的适宜的pH环境及酶解温度下控制适当的酶解时间完成所需酶解。在一个具体方案中，可按照每克牡蛎渣料加入10-100U(酶活力单位，U)的风味蛋白酶和10-100U的木瓜蛋白酶继进行酶解。对所购得的酶制剂的酶活力通过简单换算即可确定具体用量。

对于经过酶解的酶解物料需要实施灭酶，可以通过维持对该物料加热一定时间，实现灭酶。例如，灭酶条件可以为：将酶解物料加热到100-130℃，维持10s-15min。也可以根据所使用的酶制剂以及酶解程度而自行确定适当的灭酶操作，例如，也可以采用高温瞬时灭酶。