[发明专利]从低醇皂刺中提取新环烯醚萜化合物和其他化合物的方法

说明书

技术领域

本发明属于天然产物提取分离技术领域，主要涉及一种从低醇皂刺中提取新环烯醚萜化合物和其他化合物的方法。

背景技术

皂刺，又名皂角刺（Spinagleditsiae）是双子叶豆科皂角属植物皂荚（GleditsiasinensisLam.）的干燥棘刺。多年生灌木，为我国民间传统的中药材，药书《本草纲目》记载皂角刺具有消肿解毒、化脓杀虫的功效，广泛分布在我国江苏、湖北、河南、河北、四川及东北等地区，一直以来皂角刺在中国、日本和韩国等东南亚地区，广泛用于治疗中风、头疼、哮喘和疥疮等各种疾病。现代药理研究发现皂角刺还具有一定的抗菌、抗癌的功效。据文献报道皂角刺中主要化学成分为黄酮、皂苷、酚类、三萜、氨基酸、木质素及糖类等。尽管如此，皂角刺药用物质基础的研究仍然有待深入的研究，尤其随着现代分离手段和分析测试技术的快速发展，一些微量的活性物质和成份仍在不断地被探索和揭示。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提供一种从低醇皂刺中提取新环烯醚萜化合物和其他化合物的方法，该方法能够保证皂角刺中的醚和内酯等化学不稳定活性成分被有效的提取分离出来，不会发生化学键断裂或结构的变化。

本发明所采用的技术方案是：一种从低醇皂刺中提取新环烯醚萜化合物和其他化合物的方法，包括以下步骤：

步骤一、取皂刺原材料，在室温下阴干后粉碎，得到皂刺粉末，备用；

步骤二、将步骤一得到的皂刺粉末加入到体积百分比为50-65%的乙醇溶液中，室温下浸泡3-5d，浸泡结束后分离得到提取液，再重复浸泡和分离操作2-3次，合并提取液，备用；然后将提取液在0-4℃条件下静置18-26h，静置结束后过滤，并将滤液减压浓缩，得到低醇浸膏，备用；

步骤三、向步骤二得到的低醇浸膏中加入其重量7-10倍的水，搅拌使低醇浸膏溶解完全，得到混合溶液，备用；然后依次用石油醚、乙酸乙酯进行萃取，得到剩余水相，再将剩余水相减压浓缩，得到上料样品，备用；将上料样品采用大孔树脂柱色谱法进行分离，上样后采用不同浓度的乙醇溶液进行梯度洗脱，收集洗脱剂为体积百分比为50-60%乙醇溶液的馏分，并将该馏分浓缩，得到浓缩浸膏，备用；

步骤四、将步骤三得到的浓缩浸膏采用硅胶柱色谱法进行分离纯化，上样、梯度洗脱，洗脱得到的馏分经TLC检测、合并，得到馏分段1-30，备用；

步骤五、将步骤四得到的馏分段2采用硅胶柱色谱法进行分离纯化，上样后依次用体积比为30:1、20:1、10:1、5:1和1：1的乙酸乙酯-甲醇溶液进行洗脱，收集洗脱剂的体积比为10:1的馏分段，浓缩得到黄色胶状透明物，即为化合物Ⅰ；

步骤六、步骤四得到的馏分段13-15，均有固体析出，合并、过滤，得到的固体进一步采用凝胶色谱法进行等度洗脱纯化，纯化的流动相为体积比为1:1的三氯甲烷-甲醇溶液，流速为6-7滴/min，得到的馏分经减压浓缩，得到淡黄色粉末，即化合物Ⅱ；

步骤七、步骤四得到的馏分段9有固体析出，过滤后进行重结晶，得到浅黄色固体，即化合物Ⅲ；

所述化合Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ的结构式依次为：

。

进一步优化，步骤三所述的大孔树脂柱色谱法依次采用体积百分比为10%、20%、30%、40%、50%和60%的乙醇溶液进行梯度洗脱。

进一步优化，步骤四所述的硅胶柱色谱法上样后依次用体积比为1:0、10:1、9:1、5:1、2:1、1:1、1:2、1:5和0:1的乙酸乙酯-甲醇溶液以及体积比为7:3的甲醇水溶液进行洗脱。

进一步优化，步骤五的硅胶柱色谱法中，拌样硅胶粒径为100-200目，装柱硅胶粒径为200-300目。

进一步优化，步骤七过滤得到的固体采用氯仿和甲醇溶剂进行重结晶。

与现有技术相比，本发明至少具有下述优点及有益效果：