[发明专利]一种耐受高PH的凯氏拟小球藻及其培养应用

说明书

本发明公开了一种耐受高PH的凯氏拟小球藻及其培养应用，通过紫外诱变和逐级提高PH驯化筛选的方法获得耐受高PH的凯氏拟小球藻突变株FSH‑Y3，其分类命名为Parachlorella kessleri，已于2014年5月26日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.9238。本发明选育的凯氏拟小球藻FSH‑Y3在高PH值下能够更好的吸收利用二氧化碳，快速生长繁殖，解决了现有凯氏拟小球藻只能在中性PH下生长，而中性PH条件下存在二氧化碳溶解度小、固定二氧化碳效率低的问题。

技术领域

本发明属于微生物工程领域，具体涉及一种耐受高PH的凯氏拟小球藻及其培养应用。

背景技术

随着世界经济的发展，大量的化石能源的使用和消耗，导致能源的短缺和环境的日益恶化，特别是CO₂的急剧增加引起的温室效应越来越严重，微藻的生长周期短、光合效率高，CO₂固定效率高，一定条件下可达陆生植物的10 倍以上，不仅可以减少CO₂排放，同时也降低了培养成本；除CO₂外，废气中的一些SOx、NOx 等成分也随着微藻的代谢被净化处理，有效减少有害气体排放，因此利用微藻油脂作为原料生产的生物柴油是目前最有可能满足世界运输所需燃料的可再生能源。

目前对于小球藻、栅藻等产油微藻研究的较多。CN20110144545.6公开了一株栅藻藻株，该藻株的生长可利用人工培养基或经适当处理的废水生长，其特点是油脂产率高于目前大多数分藻株，该藻株应用领域包括CO₂的固定，废水的净化，油脂、蛋白质、色素、淀粉、多糖、核酸的生产。CN20120154470.4公开了一株富油海洋微藻微拟球藻(Nannochloropsis gaditana )藻株及其应用，该藻株可在pH=4.5的环境下正常生长，其油脂含量可达35%。CN20111019480.X公开了一株微藻藻株（Mychonases sp .）及其用于生产生物柴油的应用，利用该藻株可生产高附加值的多不饱和脂肪酸，包括亚麻酸 C18:3和神经酸C24:1，其在获得生物柴油的同时，获得高附加值的副产品。CN102703326A公开了一种高CO₂耐受性和固定率的微藻及其选育方法，但该专利所提供的藻株并未涉及该藻株的油脂含量。上述专利要么不能高效利用CO₂生产油脂，要么获得的生物质中油脂含量不够高。特别是在实际应用中，当环境中CO₂体积分数大于5v%时，大部分微藻的生长将受到抑制，固碳效率低；同时一般微藻在中性条件下适宜生长，在偏酸性或者偏碱性的条件下不利于微藻的生长，而微藻利用CO₂一般是以溶解在水中的HCO₃^-离子形式存在的，二氧化碳在中性环境下溶解度低，不利于藻类吸收利用。

拟小球藻属是由Krienitz, et al.提出的一个新的属，他通过对小球藻属的凯氏小球藻科核糖体小亚基团（SSU rDNA）进行系统学分析，提出将小球藻属中的凯氏小球藻（C. kessleri）划分到小球藻属，改名为凯氏拟小球藻，与拟小球藻（P. beijerinckii）、胡斯拟小球藻（P.hussii）共同构成了一个新属拟小球藻属。拟小球藻属与小球藻属之间的形态极为相似，仅在细胞壁的超微结构方面有细微差异，与小球藻属相比，凯氏拟小球藻细胞壁的电子透明度较低。但在18S rDNA及ITS序列上差异明显。