[发明专利]一种有髯鸢尾生根培养基及其培养方法

说明书

技术领域

本发明属于植物组织培养技术领域，特别涉及一种有髯鸢尾生根培养基及其培养方法。

背景技术

有髯鸢尾，鸢尾科（Iridaceae）宿根花卉，原产欧洲中部和南部，是一个几乎不育的杂种群。其花大、花形奇特、花色艳丽，垂瓣上密生色泽多变的须状附属物，具有极高的观赏价值。有髯鸢尾在园林中一般不结实，自然状态下的播种和分株因繁殖系数低而远远不能满足园林绿化建设的需要。因此，通过组织培养快速繁殖是目前尽快满足应用需求的有效途径之一。

生根培养是组培快繁体系中的重要环节，有髯鸢尾组培苗的传统生根培养基配置是以MS(或1/2MS)为基本培养基并添加一定浓度的植物生长调节剂BA、NAA或IBA等，最快生根时间需要10d以上，通常在生根培养28-40d后才能进行炼苗移栽，在这期间株丛腐烂死亡现象较严重，大大影响了繁殖效率。可见，有效缩短有髯鸢尾不定芽的生根时间对有髯鸢尾的快速繁殖具有重要意义。

多效唑（PP₃₃₃）是一种植物生长调节剂。具有延缓植物生长，抑制茎杆伸长，缩短节间、促进植物分蘖、增加植物抗逆性能，提高产量等效果，其农业应用价值在于它对作物生长的控制效应。近年来，多效唑开始应用于植物组织培养中，但应用于有髯鸢尾不定芽的快速生根培养尚属首次。

发明内容

本发明的目的是提供一种有髯鸢尾生根培养基及其培养方法。该培养基有效缩短了有髯鸢尾生根周期，加速了离体快繁效率，并且植株强壮，根系发达。

为实现上述目的，本发明是通过以下技术方案来实现的：

一种有髯鸢尾生根培养基，其特征在于：以MS为基本培养基，添加白砂糖30-40g/L，琼脂6-7g/L，多效唑0.2-1.0mg/L，pH为5.6-5.8；

优选的，所述的多效唑为15%可湿性粉剂，需现用现配；

优选的，所述白砂糖的用量为40g/L，多效唑用量为0.6mg/L；

优选的，用0.1mol/L的NaOH或HCl溶液调节pH；

优选的，所述培养基要进行灭菌操作，其灭菌温度为121℃，灭菌时间为15-20min；进一步优选的灭菌时间为20min。

一种有髯鸢尾的生根培养方法，包括以下步骤：

（1）无根组培苗接种：于超净工作台上，取继代后的2-3cm的有髯鸢尾无根组培苗分切成4株/丛，接种于上述培养基中，每瓶接种3丛；

（2）生根培养：将接种的组培苗置于培养室培养，培养室温度23-25℃，光照和黑暗交替处理，每天光照10-12h，光照强度1000-1500Lx。

优选的，步骤（2）中的培养室温度为25℃，每天光照12h。

其中，所述培养基的配制过程为：（1）根据MS各组分母液的成分及用量称取各组分，使其充分溶解，配制成母液，并按相应浓度依次取用，加蒸馏水定容至所需体积，母液成分及用量见表1；

（2）称取0.1gPP₃₃₃加水溶解定容至100ml，配成1.0mg/ml的母液待用，然后根据所需浓度取用相应量的PP₃₃₃；

（3）按所需用量加入琼脂、白砂糖等，搅拌使其充分溶解；

（4）用pH试纸测定溶液pH，并用0.1mol/L的NaOH或HCl溶液调节pH至5.6-5.8。

（5）加热烧开，将做好的生根培养基分装于150ml三角瓶中，每瓶用量75ml，用封口膜密封，放于高压蒸汽灭菌锅中灭菌，灭菌温度为121℃，灭菌时间为20min；灭菌后的培养基置于培养室静置，冷却后无污染即可用于接种。

表1.MS培养基组成及母液配制

本发明对有髯鸢尾生根培养基进行了大量的配方配制和生根培养研究，结果发现，在MS基础培养上，添加一定浓度的多效唑能够使植株提早生根且植株生长健壮、根系发达。该发明使有髯鸢尾生根时间比传统生根培养基提前10-13d，生根率提高24.26-43.33%，腐烂率降低20.62-32.36%，移栽时间提前22-26d，移栽成活率提高18.65-28.34%。显著缩短了有髯鸢尾生根培养时间，降低了生根期间的腐烂率，大大提高了离体快繁效率及培养空间的利用率。

具体实施方式

下面将结合有髯鸢尾品种“印度首领”、“白与蓝”具体实施例，详细说明本发明的具体实施方式：

实施例1