[发明专利]一种基于金银核壳磁性石墨烯吸附镉离子免疫传感器的制备方法及应用

权利要求书

1.一种基于金银核壳磁性石墨烯吸附镉离子免疫传感器的制备方法，其特征在于，步骤如下：

（1）将直径为3~5mm的玻碳电极用Al₂O₃抛光粉打磨，超纯水清洗干净；

（2） 将6 µL、1 ~ 3 mg/mL的金银核壳磁性石墨烯吸附镉离子Au/Ag @Fe₃O₄-GS @Cd²⁺溶液滴涂于电极表面上，室温下晾干；

（3）将6 µL、8 ~ 12 µg/mL的肿瘤标志物抗体溶液滴加到电极表面，超纯水冲洗，4℃冰箱中干燥;

（4）继续将3 µL、质量分数为0.5~2.0%的牛血清白蛋白BSA溶液滴加到电极表面，以封闭电极表面上非特异性活性位点，超纯水冲洗，4℃冰箱中晾干；

(5) 滴加6 µL、0.05pg/mL~ 50 ng/mL的一系列不同浓度的肿瘤标志物抗原标准溶液到电极表面，超纯水冲洗，4℃冰箱中干燥，制得一种基于金银核壳磁性石墨烯吸附镉离子免疫传感器。

2.如权利要求1所述的一种基于金银核壳磁性石墨烯吸附镉离子免疫传感器的制备方法，其特征在于，所述的Au/Ag @Fe₃O₄-GS @Cd²⁺溶液，制备步骤如下：

（1） 磁性石墨烯Fe₃O₄-GS的制备

将0.5~0.7g FeCl₃·6H₂O溶解于10mL的乙二醇中，后将1.4~1.6g的乙酸钠，5mL的乙二胺和0.5g的氧化石墨烯加入上述溶液中，磁力搅拌30min后，将该混合液转移到聚四氟乙烯反应釜中，加热至180~220℃，反应6~10小时；后冷却至室温，用50 mL的超纯水和无水乙醇清洗干净；获得的产物在50℃干燥，制得磁性石墨烯Fe₃O₄-GS；

（2）Au/Ag @Fe₃O₄-GS的制备

取0.1~0.2g的GS-Fe₃O₄加入到10mL的无水甲苯中，加入0.2mL的3−氨丙基三乙氧基硅烷，70℃下加热回流1.5h，磁分离干燥后得到氨基化磁性石墨烯NH₂- GS-Fe₃O₄；将5~15mg 的氨基化磁性石墨烯NH₂- GS-Fe₃O₄加入到50mL金银核壳纳米粒子溶液中，振荡24h，磁分离，80℃下干燥，得到Au/Ag @Fe₃O₄-GS；

所述的金银核壳纳米粒子溶液是将0.4~0.6mL、10mmol/L 的AgNO₃溶液和0.8~1.2mL、0.1mol/mL的抗坏血酸加入到20mL、50mmol/mL的表面活性剂CTAB中混合均匀，后再加入2mL的金纳米粒子溶液，逐滴加入0.1mL、浓度为1mol/L的NaOH于上述溶液中，反应1min，溶液由酒红色逐渐变为黄色得到金银核壳纳米粒子溶液；

所述的金纳米粒子溶液是将100mL、质量分数为0.01% 的HAuCl₄ 溶液加热至沸腾，加入2.5 mL、10mg/mL的柠檬酸钠溶液，回流20min，后冷却至室温，得到酒红色的金纳米粒子溶液；

（3）Au/Ag @Fe₃O₄-GS @Cd²⁺ 溶液的制备

将4~6 mg的Au/Ag @Fe₃O₄-GS加入到4 mL、2 mg/mL的硫酸镉溶液中，震荡24h，使Au/Ag@GS-Fe₃O₄吸附 Cd²⁺，磁分离后，分散到2 mL的超纯水中，制得Au/Ag @Fe₃O₄-GS @Cd²⁺溶液。

3.如权利要求1所述的制备方法制备的一种基于金银核壳磁性石墨烯吸附镉离子免疫传感器，所述肿瘤标志物选自甲胎蛋白AFP或癌胚抗原CEA。