[发明专利]一种磁微粒化学发光试剂的制备方法

权利要求书

1.一种磁微粒的包被方法，其包括步骤：

a)将磁微粒和结合缓冲液进行接触，获得第一混合物；

b)将碳二亚胺和第一混合物在20℃至30℃接触10min至1h，获得第二混合物；

c)将单克隆抗体和第二混合物在20℃至30℃避光反应2h至4h，得到包被有单克隆抗体的磁微粒；

d)向所述包被有单克隆抗体的磁微粒中加入Biolipidure-1002，在22至28℃进行2至3h封闭反应，之后在37℃反应30min；

e)终止所述封闭反应；

f)离心并收集包被有单克隆抗体的磁微粒；

其中，所述的单克隆抗体是肌红蛋白单克隆抗体。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述结合缓冲液的pH为4.5至6.0。

3.根据权利要求2所述的方法，其中所述结合缓冲液的pH选自：4.5、4.8、5.0、5.2、5.5以及上述任意两个数值之间的范围。

4.根据权利要求3所述的方法，其中所述结合缓冲液的pH为5.0。

5.根据权利要求1所述的方法，其中所述结合缓冲液是MES缓冲液。

6.根据权利要求5所述的方法，其中所述结合缓冲液是pH为5.0的0.1M MES缓冲液。

7.根据权利要求1所述的方法，其中所述磁微粒的粒径为1μm至3μm。

8.根据权利要求1所述的方法，其中所述磁微粒的粒径范围在0.8μm至1.2μm之内。

9.根据权利要求1所述的方法，其中

在步骤b)中将碳二亚胺和第一混合物在20℃至30℃接触20min至40min。

10.根据权利要求9所述的方法，步骤b)中将碳二亚胺和第一混合物在22℃至28℃混匀25min至35min。

11.根据权利要求1所述的方法，其中步骤b)碳二亚胺的浓度为8mg/ml至15mg/ml。

12.根据权利要求11所述的方法，其中步骤b)碳二亚胺的浓度为10mg/ml。

13.根据权利要求1所述的方法，其中步骤c)中将单克隆抗体和第二混合物在22℃至28℃避光反应3h。

14.根据权利要求1所述的方法，通过加入淬灭缓冲液在22℃至28℃避光反应0.5至1.5h进行所述步骤e)。

15.根据权利要求14所述的方法，所述淬灭缓冲液包含10mM PBS、1g/100ml BSA、40mM甘氨酸，且pH为7.4。

16.根据权利要求1所述的方法，包括步骤：

a)将0.8μm至1.2μm的磁微粒和pH 5.0的0.1M MES缓冲液进行接触，获得第一混合物；

b)将10mg/ml碳二亚胺和第一混合物在20℃至30℃接触30min，获得第二混合物；

c)将单克隆抗体和第二混合物在20℃至30℃避光反应3h，得到包被有单克隆抗体的磁微粒；

d)向所述包被有单克隆抗体的磁微粒中加入Biolipidure-1002，在22℃至28℃进行3h封闭反应，之后在37℃反应30min；

e)加入淬灭缓冲液在20℃至30℃避光反应1h以便终止所述封闭反应，所述淬灭缓冲液包含10mM PBS、1g/100ml BSA、40mM甘氨酸，pH为7.4；以及

f)离心并收集包被有单克隆抗体的磁微粒。