[发明专利]一种复合发酵橡胶籽脱除氰化物的方法

说明书

本发明公开一种复合发酵橡胶籽脱除氰化物的方法，该方法是采用库氏毕赤酵母（Pichia kudriavzevii）和融合魏斯氏菌（Weissella confusa）复合发酵橡胶籽脱除氰化物的方法，该方法将库氏毕赤酵母与融合魏斯氏菌分别活化培养，至有效活菌数≥10¹⁰CFU/mL，混合后添加到水与粉碎后的橡胶籽仁混合的培养基中培养；经研究发现，复合发酵对氰化物的脱除效果均很好，氰化物脱除率均在88.9%以上。乳酸菌产酸能抑制杂菌生长，酵母发酵增加香味，在保证橡胶籽不变质的前提下，有效脱除氰化物。

技术领域

本发明涉及一种库氏毕赤酵母和融合魏斯氏菌复合发酵橡胶籽脱除氰化物的方法，属于生物技术领域。

背景技术

橡胶（Hevea brasiliensis）大戟科乔木，高可达30米，有丰富乳汁。橡胶树是一种典型的热带作物，原产巴西；现广泛栽培于亚洲热带地区。云南河口、西双版纳、瑞丽种植较多；广东、广西、海南、福建南部和台湾有栽培。蒴果椭圆形，直径5-6厘米，有3纵沟，顶端有喙尖，基部略凹，外果皮薄，下后有网状脉纹，内果皮厚，木质；种子椭圆形，浅灰褐色，有斑纹。橡胶籽是橡胶树的副产物。过去很长时间，大量的橡胶籽没有得到合理的综合利用，被作为废弃物丢弃与橡胶林地中腐烂。橡胶籽仁含油40%-50%。在橡胶籽油的脂肪酸组成（其含软脂酸：5%-10%，油酸：20%-28%，亚油酸：30%-42%，亚麻酸：15%-22%）中，不饱和脂肪酸占80%以上，其中多不饱和脂肪酸占50%以上，而饱和脂肪酸仅占16.5%-17.5 %。C_18:3是n-3家族多不饱和脂肪酸的前体，机体摄入后可转变为DHA和EPA，DHA对脑神经生长发育、婴儿视觉发育、儿童智能发育和抗过敏、增强免疫有至关重要的作用。EPA具有帮助降低胆固醇和甘油三酯的含量，促进体内饱和脂肪酸代谢，从而起到降低血液粘稠度，增进血液循环，提高组织供氧而消除疲劳，二者在医药保健方面具重要价值，然而橡胶籽粕中氨基酸含量与豆粕很相似，脱除氰化物以后可作为饲料资源使用。因此作为一种废弃物，橡胶籽有巨大的开发价值。

氰化物是指含氰基的化合物，植物中的氰化物是以苷形式存在的氢氰酸有机衍生物，即使氰甙本身无毒性，但当其水解释放出游离的氰化氢后，就会引起动物中毒。富含氰甙的植物有青饲料木薯、高粱和玉米的幼苗、亚麻以及蔷薇科植物的叶子和种子。氰离子对细胞线粒体内呼吸链的细胞色素氧化酶具有很高的亲和力，与细胞色素氧化酶的结合后使之失去活性，从而阻断细胞呼吸和氧化磷酸化过程。细胞色素氧化酶是以铁卟啉为辅基的蛋白质，含有两个血红素A基团和两个铜原子，分别为细胞色素a和a3。a和a3两个成分至今未能分离，故将细胞色素a和a3合称为细胞色素氧化酶。在化学结构上，血红素a和a3具有一致性。近年来的研究指出，可能血红素a和a3结合于不同的蛋白亚基上。氢氰酸对细胞色素氧化酶的抑制作用，主要是—C≡N与细胞色素a3中的铁离子（Fe³⁺）配位结合，阻止其还原成Fe²⁺所造成。由于橡胶籽中含有少量的生氰葡萄糖苷，分子中含有氰基 (—C≡N )，其化学性质不稳定，可被植物中的酶或稀酸水解，因此橡胶籽粕或饼使用前均须脱毒。

1969年首次发现某些酵母可以利用甲醇为唯一碳源和能源生长，此后，用甲醇利用型酵母生产单细胞蛋白作为动物饲料的潜力就引起了广泛关注。库氏毕赤酵母曾被用于生产单细胞蛋白，有很好的发酵基础，其生长培养液的组分包括无机盐、微量元素、生物素、氮源和碳源，廉价而无毒。魏斯氏菌属于乳酸菌，常被发现于泡菜等腌制食品中，其在卫生、医学、发酵、食品加工等方面的作用开始受到广泛关注。微生物发酵脱除方法有单一发酵脱毒和复合发酵脱毒，单一发酵脱毒的研究和开发较多，目前的发展趋势是研制复合发酵。复合发酵能适应多种环境条件，达到更好的效果。

发明内容

针对现有微生物复合发酵脱除氰化物的研究较少，本发明的目的在于提供一种库氏毕赤酵母和融合魏斯氏菌混合发酵橡胶籽脱除氰化物的方法。