[发明专利]一种利用质谱检测外泌体小分子代谢物的方法

权利要求书

1.一种利用质谱检测外泌体小分子代谢物的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1：仪器与试剂的准备：激光解析电离质谱，正离子模式检测，只有信噪比大于10的质谱信号用于定性和定量分析；

步骤2：制备含铁氧化物纳米颗粒基质，所述含铁氧化物纳米颗粒基质的制备包括以下步骤：

2.1：将三氯化铁和柠檬酸三钠溶解在乙二醇溶液中；

2.2：在上述的混合溶液中加入乙酸钠，并在室温下超声半小时直到溶液变成均相体系；

2.3：反应在铁氟龙高压反应釜中进行，150-195摄氏度条件下反应8小时以上，从而形成含铁氧化物纳米颗粒；

2.4：将步骤2.3中得到的所述含铁氧化物纳米颗粒用乙醇和去离子水反复冲洗，最后在62～70摄氏度下干燥以备使用；

2.5：将所述含铁氧化物纳米颗粒重悬在去离子水中，作为基质使用；

步骤3：提取外泌体，将稀释后的外泌体样品点样在靶板上，室温下干燥；

步骤4：在所述外泌体样品上点所述含铁氧化物纳米颗粒基质，室温下干燥；

步骤5：对步骤4中得到的外泌体样品进行质谱检测；

步骤6：对质谱检测结果进行分析，得出结论；

其中，检测的分子包括糖类和氨基酸，检测分子量范围为小于等于10000D；

所述含铁氧化物纳米颗粒基质的直径小于1μm，颗粒粒度均一，所述含铁氧化物纳米颗粒基质具有粗糙表面；

所述含铁氧化物纳米颗粒基质为Fe_xO_y或其混合物,其中x为小于等于10，y为大于等于0小于等于10。

2.根据权利要求1所述的一种利用质谱检测外泌体小分子代谢物的方法，其特征在于，所述含铁氧化物纳米颗粒基质的尺寸范围为200nm～300nm。

3.根据权利要求1所述的一种利用质谱检测外泌体小分子代谢物的方法，其特征在于，所述含铁氧化物纳米颗粒基质的所述粗糙表面由50nm以下的纳米小球组成。

4.根据权利要求1所述的一种利用质谱检测外泌体小分子代谢物的方法，其特征在于，所述含铁氧化物纳米颗粒基质的所述粗糙表面由直径为5nm～8nm的纳米小球组成。

5.根据权利要求1所述的一种利用质谱检测外泌体小分子代谢物的方法，其特征在于，对外泌体的稀释倍数小于10000倍以得到所述外泌体样品。

6.根据权利要求1所述的一种利用质谱检测外泌体小分子代谢物的方法，其特征在于，所述外泌体包括血清，血浆和细胞中提取的外泌体。