[发明专利]一种用于乳腺癌诊断的miRNA标志物、其应用及诊断试剂盒在审
| 申请号： | 201510925729.4 | 申请日： | 2015-12-14 |
| 公开（公告）号： | CN105586401A | 公开（公告）日： | 2016-05-18 |
| 发明（设计）人： | 卢正斌;李万帅;张琦 | 申请（专利权）人： | 常州杰傲医学检验所有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 上海精晟知识产权代理有限公司 31253 | 代理人： | 金波 |
| 地址： | 213000 江苏省常州市武进区*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 乳腺癌 诊断 mirna 标志 应用 试剂盒 | ||
1.一种用于乳腺癌诊断的microRNA标志物，其特征在于所述标 记物包括miR-146a、miR-155、miR-21、miR-222和miR-339。
2.一种如权利要求1所述的用于乳腺癌诊断的miRNA标志物在 制备乳腺癌诊断试剂盒中的应用。
3.一种乳腺癌诊断试剂盒，其特征在于能够测定组织中的 miR-146a、miR-155、miR-21、miR-222和miR-339的含量。
4.如权利要求3所述的乳腺癌诊断试剂盒，其特征在于含有 miR-146a、miR-155、miR-2、miR-222和miR-339的引物和探针。
5.一种如权利要求4所述的肺癌诊断试剂盒，其特征在于所述引 物和探针针对的目标序列如SEQIDNO.1、SEQIDNO.2、SEQID NO.3、SEQIDNO.4和SEQIDNO.5所示。
6.如权利要求3-5任一项所述肺癌诊断试剂盒，其特征在于所述 试剂盒中含有美国应用生物系统公司的引物探针组合，其产品编号分 别为000468、002623、000397、002276和002184。
7.如权利要求6所述肺癌诊断试剂盒，其特征在于所述试剂盒中 还含有内参RNU44。
8.一种如权利要求3-5任一项所述肺癌诊断试剂盒的使用方法， 其特征在于包括如下步骤：
(1)从待测试样品中提取总RNA；
(2)将步骤(1)提取得到的总RNA使用miRNA逆转录试剂 盒进行逆转录反应，得到相应的cDNA；
(3)将步骤(2)得到的cDNA进行实时荧光定量PCR，并以 RNU44为内参，检测结果以△Ct表示，其中△Ct＝CtmiRNA-CtRNU44；
(4)将得到的结果代入公式 0.987+0.032a-0.084b-0.061c+0.045d+0.004e中，将计算值与0.709比 较。
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