[发明专利]一种龙胆泻肝汤配方颗粒的制备方法及其质量控制方法

权利要求书

1.一种龙胆泻肝汤配方颗粒的质量检测方法，其特征在于，包括以下方法：

（1）采用红外指纹图谱进行质量控制，具体步骤如下：

取龙胆泻肝汤配方颗粒适量，研细，取0.5g，加无水乙醇20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，得到无水乙醇提取物；将无水乙醇提取物采用红外指纹图谱进行质量鉴别，红外指纹图谱鉴别方法为：用傅里叶变换红外光谱仪，测定范围为4000cm-1~400cm-1，DTGS检测器，分辨率4cm-1，扫描次数16次，扫描过程时时扣除水和二氧化碳的干扰，环境相对湿度低于60%，溴化钾直接压片法进行检测；龙胆泻肝汤配方颗粒红外指纹图谱具有以下特征：最强峰：峰位1052.05cm^-1，次强峰：峰位2929.65cm^-1，较强峰：峰位1407.76cm^-1，与1384.73cm^-1形成峰簇，在1616.30 cm^-1、1270.86 cm^-1各具有一个峰，同时依据峰强从高到低出现925.87cm^-1、775.08cm^-12个峰；

（2）采用薄层色谱定性鉴别：

取龙胆泻肝汤配方颗粒2g，加甲醇20ml，超声处理10分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取龙胆苦苷对照品、栀子苷对照品、甘草苷对照品，分别加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法《中国药典》2010年版一部附录ⅥB试验，吸取上述供试品溶液、对照品溶液各2～5μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以乙酸乙酯-丙酮-水7∶5∶1为展开剂，展开2 次，取出，晾干，置紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与龙胆苦苷对照品、栀子苷对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，再喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯365 nm下检视，供试品色谱中，在与甘草苷对照品色谱相应位置上，显相同颜色的荧光斑点；

（3）采用薄层色谱定性鉴别：

取龙胆泻肝汤配方颗粒2g，加甲醇20ml，超声处理10分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法《中国药典》2010年版一部附录ⅥB试验，吸取供试品溶液2～5μl及对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水5∶3∶1：1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%三氯化铁乙醇溶液，供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点；

（4）采用薄层色谱定性鉴别：

取龙胆泻肝汤配方颗粒5g,加甲醇60ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用乙醚振摇提取3次，每次15ml,弃去乙醚液，水液用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次15ml，合并正丁醇液，用与正丁醇液同体积的氨试液洗涤1次，再用正丁醇饱和的水洗涤2次,每次15ml，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取柴胡皂苷a对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液；吸取上述供试品溶液、对照品溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-正丁醇-甲醇-水30∶1∶10∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%对二甲氨基苯甲醛的40%硫酸溶液，在60℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

（5）采用薄层色谱定性鉴别：

取龙胆泻肝汤配方颗粒5g，加水30ml使溶解，用乙醚萃取二次，每次20ml，合并乙醚液，挥干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液；另取泽泻对照药材2g，加水80ml，煮沸30分钟，滤过，滤液浓缩至约30ml，用乙醚萃取二次，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法《中国药典》2010年版一部附录ⅥB试验，吸取上述两种溶液各10µl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸8∶4∶0.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

（6）龙胆泻肝汤配方颗粒的含量测定，采用高效液相色谱法，具体步骤如下：

色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇为流动相A，以0.2%磷酸溶液为流动相B，双波长检测，理论板数按龙胆苦苷、栀子苷和黄芩苷峰计算应均不低于3000；

对照品溶液的制备 取龙胆苦苷对照品、栀子苷对照品和黄芩苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含龙胆苦苷40μg、栀子苷30μg和黄芩苷85μg的混合溶液，即得；

供试品溶液的制备 取本品，研细，取约0.25g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理20分钟，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；

本品每1g含龙胆以龙胆苦苷C₁₆H₂₀O₉计，不得少于2.0mg；含栀子以栀子苷C₁₇H₂₄O10计，不得少于8.5mg；含黄芩以黄芩苷C₂₁H ₁₈O₁₁计，不得少于17.0mg；

所述龙胆泻肝汤配方颗粒由龙胆、栀子、黄芩、泽泻、地黄、车前子、当归、柴胡、川木通、甘草十味饮片按质量比为1-5:1-5:1-5:1-5:1-5:1-5:1-5:1-5:1-5:1-5制成，其制备方法包括如下步骤：

a、取龙胆、栀子、黄芩、泽泻、地黄、车前子、当归、柴胡、川木通、甘草十味饮片加入总投料量5-15倍重量的水，煎煮提取0.5-2小时，即一煎；一煎后药渣加入总投料量4-10倍重量的水，煎煮提取0.5-1.5小时，即二煎；

b、合并两煎滤液，滤过，滤液真空减压浓缩至相对密度为1.00~1.14的浓缩液；

c、取浓缩液进行喷雾干燥，得喷干粉，喷干粉采用气流粉碎机粉碎成超微粉；

d、将超微粉加入麦芽糊精干法制粒，制得粒度在16-40目的龙胆泻肝汤配方颗粒。