[发明专利]用于去除可浸出物和/或可提取物的活性炭

说明书

本发明涉及纯化靶分子，如重组和/或生物治疗蛋白。可用活性炭去除由过程中所用可弃式设备产生的可浸出物和/或可提取物。

本发明涉及纯化靶分子，如重组和/或生物治疗蛋白，例如，由细胞表达系统产生。可用活性炭去除由过程中所用可弃式设备产生的可浸出物和/或可提取物。

发明背景

有效和经济地大规模制备生物分子是生物技术和制药工业上越来越重要的考虑，例如，治疗蛋白，包括抗体、肽或激素。一般纯化过程很复杂，花费大，且包括很多不同步骤。

一般蛋白用细胞培养方法制备，例如，使用哺乳动物或细菌细胞系，经重组工程以制备关注蛋白。通常，在靶蛋白表达后，从一种或多种杂质(例如，宿主细胞蛋白、培养基组分和核酸)分离造成难以克服的挑战。如果治疗蛋白要用于人，且必须由管理机构例如美国食品药物管理局(FDA) 批准，则这种分离和纯化尤其重要。

现今用于纯化蛋白的常规方法通常至少包括以下步骤：(a)用于去除细胞和细胞碎片的澄清步骤，例如，使用差分离心和/或过滤；和(b)从澄清细胞培养进料中的不同杂质分离关注蛋白的一个或多个下游色谱步骤。

因此，制备和纯化生物分子是涉及数个类型纯化介质和数个类型设备的多步过程。

出于灵活、安全、减少的资本和操作费用的生产，在生物制药工业有一个新出现趋势是将一次使用和/或可弃式塑料材料。可弃式生物处理设备可在宽范围和规模使用，从溶液容器、输送管到各种装置。在制备过程期间，这些设备组件与产物直接接触。已发现，来自塑料材料的可浸出物和/或可提取物可最终存在于成品中(W. Ding, Chemie IngenieurTechnik 2013, 85, No 1-2, 186-196)。虽然可浸出物/可提取物的水平通常低于工业指导(Q3C)中所给的水平，但问题是，即使低水平可浸出物/可提取物也可能影响药品安全性，并影响性能，导致产品安全和质量问题。

因此，需要在生物过程中从靶生物分子去除可浸出物/可提取物，以保证药品安全性和质量，同时使用可弃式设备。

发明概述

已发现，可通过经活性炭装置过滤去除或减少在靶分子制备中由使用可弃式设备产生的可浸出物/可提取物的量。

因此，本发明涉及纯化靶分子的方法，其制备和/或纯化过程包括使用可弃式设备，其中用活性炭使靶分子与可浸出物和/或可提取物分离。一般通过使活性炭与包含靶分子和潜在可浸出物和/或可提取物的液体接触，进行纯化，其中可浸出物和/或可提取物在与活性炭接触时保持或结合到活性炭上，而包含靶分子的液体不结合，然后例如通过过滤从活性炭分离。

在一个实施方案中，靶分子为具有10000或更大分子量的蛋白。

在一个实施方案中，靶分子为糖蛋白。

在一个实施方案中，靶分子为抗体。

在一个优选的实施方案中，可浸出物和/或可提取物为一种或多种以下组分：乙醛、甲苯、2-己酮、丙酮、2-丁酮、乙酸乙酯、双酚A、苄醇、三甲基硅烷醇、甲醛、苯二甲酸双(2-乙基己基)酯、乙酸1-甲基乙酯、2,4-二叔丁基苯酚、2-辛酮、2-戊酮、3,3-二甲基-2-丁酮、3-乙氧基丙烷、3-己酮、3-甲氧基-1-丁醇、丁醛、环己酮、乙醇、甲酸、七乙二醇、己醛、甲基·异丁基酮、戊醛、叔丁醇、四氢呋喃、甲酸甲酯。

在一个优选的实施方案中，方法在3至9之间的pH进行。

在另一个优选的实施方案中，活性炭为通过有机聚合材料、优选聚苯乙烯热解得到的活性炭。

在一个优选的实施方案中，活性炭具有5和40µm之间的中值粒径。

在一个实施方案中，通过经一个或多个包含活性炭的滤器过滤使靶分子与可浸出物和/或可提取物分离。