[发明专利]具有增加的疏水性的蛋白质及蛋白质偶联物

权利要求书

1.一种微球，包含：

可生物降解聚合物；和

蛋白质混合物，选自由蛋白质-聚乙二醇偶联物与有机酸的疏水性阴离子、蛋白质与所述有机酸的疏水性阴离子、及其组合所组成的组。

2.如权利要求1所述的微球，其中所述蛋白质或所述蛋白质-聚乙二醇偶联物中的蛋白质包括人生长激素。

3.如权利要求1所述的微球，其中所述蛋白质或者所述蛋白质-聚乙二醇偶联物中的蛋白质包括胰高血糖素样肽-1。

4.如权利要求3所述的微球，还包含胰岛素-聚乙二醇偶联物。

5.如权利要求1所述的微球，其中所述蛋白质或者所述蛋白质-聚乙二醇偶联物中的蛋白质选自由胰岛素、甲状旁腺激素、甲状旁腺激素的片段、恩夫韦肽、和奥曲肽所组成的组。

6.如权利要求1所述的微球，其中所述有机酸包括双羟萘酸、多库酯氢、糠酸、或者其混合物。

7.如权利要求1所述的微球，其中：

所述蛋白质混合物包含所述有机酸的疏水性阴离子，并且

所述有机酸的疏水性阴离子包括脂肪酸阴离子、磷脂阴离子、聚苯乙烯磺酸盐阴离子、或者其混合物。

8.如权利要求7所述的微球，其中所述疏水性阴离子包括所述磷脂阴离子，并且所述磷脂是磷脂酰胆碱、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰肌醇、磷脂酰乙醇胺、磷酰胆碱、或者其混合物。

9.如权利要求1所述的微球，其中：

所述蛋白质混合物包含所述蛋白质-聚乙二醇偶联物，并且

所述蛋白质-聚乙二醇偶联物中的聚乙二醇包括甲氧基聚乙二醇乙醛。

10.如权利要求1所述的微球，其中：

所述蛋白质混合物包含所述有机酸的疏水性阴离子，并且

所述有机酸包括双羟萘酸，并且所述疏水性阴离子包括双羟萘酸盐阴离子。

11.如权利要求1所述的微球，其中：

所述蛋白质混合物包含所述蛋白质-聚乙二醇偶联物和所述有机酸的疏水性阴离子，并且

所述有机酸的疏水性阴离子与所述蛋白质-聚乙二醇偶联物的摩尔比是在1:1至11:1的范围内。

12.如权利要求1所述的微球，其中：

所述蛋白质混合物包含所述蛋白质-聚乙二醇偶联物，并且

所述蛋白质-聚乙二醇偶联物包括单聚乙二醇修饰的偶联物。

13.如权利要求1所述的微球，其中所述可生物降解聚合物选自由聚乳酸、聚乙交酯、(d,l-乙交酯-丙交酯)共聚物、聚己内酯、聚原酸酯、聚酯与聚醚的共聚物、和聚乳酸与聚乙二醇的共聚物所组成的组。

14.如权利要求1所述的微球，其中所述可生物降解聚合物包括(d,l-乙交酯-丙交酯)共聚物。

15.如权利要求1所述的微球，其中所述可生物降解聚合物具有7,000Da至17,000Da的分子量。

16.一种制备具有增加的疏水性的蛋白质-PEG偶联物盐的方法，所述方法包括：

提供包含蛋白质和pH缓冲剂的蛋白质水溶液；

使聚乙二醇与所述蛋白质反应而形成蛋白质-PEG偶联物；和

利用疏水性有机酸使所述蛋白质-PEG偶联物上的氨基质子化，其中所述质子化形成具有增加所述蛋白质-PEG偶联物盐的疏水性的疏水性阴离子的所述蛋白质-PEG偶联物盐。

17.如权利要求16所述的方法，其中使所述聚乙二醇与所述蛋白质反应包括：

在所述聚乙二醇与所述蛋白质之间形成胺键、酰胺键、酯键、或二硫键；或者

使巯基反应性聚乙二醇结合到所述蛋白质的半胱氨酸残基。

18.一种制备具有增加的疏水性的蛋白质-PEG偶联物的方法，所述方法包括：

提供包含蛋白质和pH缓冲剂的蛋白质水溶液；和

使聚乙二醇与所述蛋白质反应而形成所述蛋白质-PEG偶联物，其中所述蛋白质-PEG偶联物具有高于所述蛋白质的疏水性。

19.如权利要求18所述的方法，其中所述方法不包括利用疏水性有机酸使所述蛋白质上的氨基质子化。