[发明专利]具有增加的疏水性的蛋白质及蛋白质偶联物

说明书

相关申请的交叉引用

本申请要求下列专利申请的优先权：于2014年12月2日提交的美国临时专利申请第62/086,294号、于2015年11月30日提交的名称为“具有增加的疏水性的蛋白质及蛋白质偶联物”的美国专利申请第14/954,591号、和于2015年11月30日提交的名称为“具有增加的疏水性的蛋白质及蛋白质偶联物”的美国专利申请第14/954,701号。这些专利申请的内容以参考的方式并入本文中用于所有目的。

背景技术

将药物、激素、蛋白质、或其他医学活性剂传输进入患者体内面临着一些挑战。医学活性剂必须被传输进入患者体内。两个这种方法是口服和注射。就口服而言，药物在到达血流或用于治疗的靶向区域之前会必须通过患者的消化系统。注射可使医学活性剂能够快速地且直接地到达血流或用于治疗的靶向区域，但注射对于患者而言会是不方便的或疼痛的。一旦在身体内，作为时间函数的医学活性剂的浓度会基于医学活性剂的类型、不同官能团或分子在医学活性剂上的结合、医学活性剂的包封、或其他因素而变化。如果医学活性剂的浓度下降至低于阈值，则会需要对医学活性剂进行再次给药。许多医学活性剂必须频繁地给药，包括每天数次。更频繁的给药方案会增加患者的不方便、会降低患者的依从率，并且会导致不太理想的患者预后。如果医学活性剂是通过注射而给药，那么另一次注射增加疼痛的频率、感染的危险性、和在患者中产生免疫应答的可能性。因此，对于具有优越的在患者体内的浓度分布的医学活性剂存在着需求。本文中所描述的方法和组合物提供针对这些和其他需求的解决方案。

发明内容

医学活性剂可结合到脂肪链、聚乙二醇(PEG)、疏水性阴离子、或其他化合物。聚乙二醇的结合会增加医学活性剂的分子量并且会导致医学活性剂的半衰期的增加。此外，聚乙二醇(包括较小的PEG分子)或疏水性阴离子与医学活性剂的结合可增加医学活性剂的疏水性并且可使医学活性剂成为两亲性。利用可生物降解聚合物可使医学活性剂更容易地溶解于有机溶剂。该可生物降解聚合物可将医学活性剂包封在微球中。医学活性剂的包封可增加医学活性剂的半衰期。本文中所描述的制剂可在一个时间段内缓慢地且均匀地释放医学活性剂。该释放特性会导致在无需赋形剂的情况下在预定的治疗期内持续的几乎无峰值的蛋白质水平。医学活性剂在患者体内所形成的浓度分布可导致在患者中的更优的临床结果。本文中所描述的制剂可以以每月一次的频率向患者给药。制造这些制剂的工艺会是高效的、高产率的、或者不过分地高成本。

实施例可包括一种制备具有增加的疏水性的蛋白质-PEG偶联物盐的方法。该方法可包括提供蛋白质水溶液。此蛋白质水溶液可包含蛋白质和pH缓冲剂。该方法也可包括使聚乙二醇与蛋白质反应而形成蛋白质-PEG偶联物。该方法还可包括利用疏水性有机酸使在蛋白质-PEG偶联物上的氨基质子化。该质子化可在有机相中进行。该质子化可形成具有可增加PEG偶联物盐的疏水性的疏水性阴离子的蛋白质-PEG偶联物盐。

实施例可包括制备具有增加的疏水性的蛋白质-PEG偶联物的方法。该方法可包括提供可包含蛋白质和pH缓冲剂的蛋白质水溶液。该方法还可包括使聚乙二醇与蛋白质反应而形成蛋白质-PEG偶联物。蛋白质-PEG偶联物可具有高于蛋白质的疏水性。

实施例可包括一种制备具有增加的疏水性的蛋白质盐的方法。该方法可包括提供含有蛋白质和pH缓冲剂的蛋白质水溶液。该方法还可包括利用疏水性有机酸使在蛋白质上的至少一个氨基质子化。该质子化可形成具有可增加蛋白质盐的疏水性的疏水性阴离子的蛋白质盐。

在实施例中，制备含有蛋白质-PEG偶联物盐的控释微球的方法可包括提供蛋白质水溶液。该蛋白质水溶液可包含蛋白质和pH缓冲剂。该方法还可包括使聚乙二醇与蛋白质反应而形成蛋白质-PEG偶联物。另外，该方法可包括利用疏水性有机酸使在蛋白质-PEG偶联物上的氨基质子化。该质子化可形成具有疏水性阴离子的蛋白质-PEG偶联物盐。此外，该方法可包括将有机溶剂中的蛋白质-PEG偶联物盐与可生物降解聚合物加以混合。蛋白质-PEG偶联物盐的疏水性阴离子可增加该盐在有机溶剂中的溶解度。该方法还可包括在水溶液中使蛋白质-PEG偶联物盐与可生物降解聚合物的混合物乳化。此外，该方法可包括使蛋白质-PEG偶联物盐与可生物降解聚合物的乳化的混合物硬化成控释微球。

实施例可包括微球。该组合物可包含可生物降解聚合物。此外，微球可包含选自由蛋白质-聚乙二醇偶联物、蛋白质-聚乙二醇偶联物与有机酸的疏水性阴离子、蛋白质与有机酸的疏水性阴离子、及其组合所组成的组群的蛋白质混合物。