[发明专利]一种花生杂交种的分子鉴定方法有效
申请号: | 201610060425.0 | 申请日: | 2016-01-27 |
公开(公告)号: | CN105525012B | 公开(公告)日: | 2019-04-16 |
发明(设计)人: | 李国卫;万书波;崔凤;刘译阳;徐国鑫;韩燕;孙秀芹 | 申请(专利权)人: | 山东省农业科学院生物技术研究中心 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895 |
代理公司: | 济南诚智商标专利事务所有限公司 37105 | 代理人: | 韩百翠 |
地址: | 250100 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 花生 杂交种 分子 鉴定 方法 | ||
1.一种鲁花14×Tifrunner杂交种的分子鉴定方法,其特征是,提取鲁花14×Tifrunner杂交种的花生基因组DNA作为模板,采用如SEQ No.6-7所示的引物进行PCR扩增,回收目的片段,经限制性内切酶HindⅢ酶切后再采用琼脂糖凝胶电泳检测,出现755bp和393bp片段的判定为杂交种。
2.如权利要求1所述的一种鲁花14×Tifrunner杂交种的分子鉴定方法,其特征是,所述PCR扩增采用20μL扩增体系,它包含10μL PCR-mix,正向引物、反向引物各0.2μM,50ng模板DNA,7μL无菌ddH2O;所述10μL PCR-mix含有以下成分:1U Taq DNA聚合酶,2.5μL 10×PCR缓冲液,2.5mM MgCl2,200μM dNTPs。
3.如权利要求1或2所述的一种鲁花14×Tifrunner杂交种的分子鉴定方法,其特征是,所述PCR扩增的PCR反应程序为:94℃预变性3min;94℃1min,55℃30s,72℃1min,共35个循环;72℃延伸10min;16℃保存。
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