[发明专利]一种从人参醇提后药渣中提取人参酸性多糖的制备方法有效
申请号: | 201610100811.8 | 申请日: | 2016-02-23 |
公开(公告)号: | CN107098985B | 公开(公告)日: | 2020-10-27 |
发明(设计)人: | 王贵金;杜红娜;乔莉;毕丹;贾继明;宋剑;王宗权;姜新刚;常丽萍 | 申请(专利权)人: | 石家庄以岭药业股份有限公司 |
主分类号: | C08B37/00 | 分类号: | C08B37/00 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 050035 河北省石*** | 国省代码: | 河北;13 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 人参 醇提后 药渣 提取 酸性 多糖 制备 方法 | ||
1.一种从人参醇提后药渣中提取人参酸性多糖的制备方法,其特征在于该人参酸性多糖制备方法包括以下步骤:
A.制备人参粗多糖:称取人参醇提后的干燥药渣,每次加入15-25倍量的水,提取2次,合并水提液离心,上清液经减压浓缩,加入乙醇制成醇浓度为45%-75%醇溶液,醇沉过夜,离心;沉淀经醇洗脱后挥尽乙醇,沉淀用水充分溶解,加入0.19%-0.31%的中温淀粉酶,酶解22-37分钟;加入0.75%-1.25%的多糖专用大孔径活性炭,脱色30-50分钟,离心,去除活性炭;上清液经微孔滤膜过滤,溶液减压浓缩,加入乙醇制成醇浓度为45%-75%醇溶液,醇沉过夜,离心,沉淀经醇洗脱后挥尽乙醇,得人参多糖粗品;
B.第一次纯化:取阴离子交换树脂D900处理备用,称取人参多糖粗品,溶于75-125倍量的纯化水后上树脂柱,用3-5倍柱体积的蒸馏水洗脱,控制体积流量为1.5 BV/h -2.5BV/h,再用4-6倍柱体积浓度为0.3M的NaCl溶液洗脱,控制体积流量为1.5 BV/h -2.5BV/h,收集氯化钠洗脱液,即为人参酸性多糖的氯化钠洗脱液;
C.第二次纯化:取人参酸性多糖的氯化钠洗脱液,40℃-75℃减压浓缩至溶液变浑浊为止,浑浊液冷藏过夜,离心,收集沉淀,加入纯化水,加热使沉淀溶解至澄清;
D.第三次纯化:步骤C纯化后的溶液用超滤法脱盐,超滤膜包的截留分子量为0.75 kd-1.25kd,超滤洗脱溶剂为超纯水,超滤时的压力为进口1.88 bar -3.12bar,回流口1.35bar -2.35bar,蠕动泵的转速为7.5 rpm -12.5rpm,期间不断补充洗脱溶剂,检测溶剂为10%的硝酸银溶液,超滤脱盐的终点为母液和流出液加入硝酸银溶液均无浑浊;40℃-75℃减压浓缩后,加入乙醇制成醇浓度为45%-75%醇溶液,醇沉过夜,离心,沉淀经60%醇洗脱两次,沉淀用纯化水充分溶解,得到人参酸性多糖的精制溶液;
E. 干燥:步骤D纯化后的溶液经喷雾干燥机进行干燥,即得人参酸性多糖。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于所述人参酸性多糖制备方法包括以下步骤:
A.制备人参粗多糖:称取人参醇提后的药渣,每次加入15倍量的水,提取2次,合并水提液离心去沉淀,上清液经减压浓缩,加入乙醇制成醇浓度为75%醇溶液,醇沉过夜,离心,沉淀经60%醇洗脱两次,沉淀用水充分溶解,65℃时,加入0.19%的中温淀粉酶,酶解37分钟,加入0.75%的多糖专用大孔径活性炭,脱色50分钟,离心,去除活性炭,上清液经微孔滤膜过滤,溶液减压浓缩,加入乙醇制成醇浓度为45%醇溶液,醇沉过夜,离心,沉淀经60%醇洗脱两次,沉淀挥尽乙醇,得人参多糖粗品;
B.第一次纯化:取阴离子交换树脂D900处理备用,称取人参多糖粗品,溶于125倍量的纯化水后上树脂柱,用5倍柱体积的蒸馏水洗脱,控制体积流量为1.5BV/h,再用6倍柱体积浓度为0.3M的NaCl溶液洗脱,控制体积流量为1.5BV/h,收集氯化钠洗脱液,即为人参酸性多糖的氯化钠洗脱液;
C.第二次纯化:取人参酸性多糖的氯化钠洗脱液,75℃减压浓缩至溶液变浑浊为止,浑浊液冷藏过夜,离心,收集沉淀,加入纯化水,加热使沉淀溶解至澄清;
D.第三次纯化:步骤C纯化后的溶液用超滤法脱盐,超滤膜包的截留分子量为0.75kd,超滤洗脱溶剂为超纯水,超滤时的压力为进口3.12bar,回流口1.35bar,蠕动泵的转速为12.5rpm,期间不断补充洗脱溶剂,检测溶剂为10%的硝酸银溶液,超滤脱盐的终点为母液和流出液加入硝酸银溶液均无浑浊,40℃减压浓缩脱盐后的人参酸性多糖溶液,加入乙醇制成醇浓度为75%醇溶液,醇沉过夜,离心,沉淀经60%醇洗脱两次,沉淀用纯化水充分溶解,得到人参酸性多糖的精制溶液;
E. 干燥:步骤D纯化后的溶液经喷雾干燥机进行干燥,即得人参酸性多糖。
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