[发明专利]可实现鸡血清白蛋白鉴定及绝对定量的试剂盒及测定方法

说明书

可实现鸡血清白蛋白鉴定及绝对定量的试剂盒及测定方法,该试剂盒由标准物质和反应试剂两部分组成，标准物质包括：特征肽段及其内标肽段；反应试剂包括：碳酸氢铵、二硫苏糖醇、碘乙酰胺、胰蛋白酶、甲酸。通过将含鸡血清白蛋白样品与反应试剂按一定的体积比混合，温育振荡后，使之发生酶解反应，再将标准物质和/或最终酶解产物分别注入高效液相色谱‑串联质谱仪中，根据母离子和子离子的质荷比（m/z）及特征肽段的保留时间（tR）进行定性鉴别，通过色谱峰面积变化测算出鸡血清白蛋白的绝对含量。

技术领域

本发明涉及一种可实现鸡血清白蛋白鉴定及绝对定量的检测试剂盒及测定方法，属于检验测定技术领域。

背景技术

血清白蛋白约占血浆总蛋白的40～60％，是血浆中主要载体，起维持渗透压、pH缓冲、载体和营养作用，许多水溶性差的物质可以通过与其结合而被运输，如，胆红素、长链脂肪酸、胆汁酸盐、前列腺素、类固醇激素、金属离子及药物等。有关检测血清白蛋白的检测方法有免疫双扩散法、免疫电泳法、双缩尿法、钨酸沉淀法和毛细管电泳法等。这些方法有易污染、背景值高的缺点，常使检测灵敏度降低，并且特异性较差；高压毛细管电泳法虽有较高准确度，但常易受到分子量大小接近的蛋白干扰，使检测特异性、灵敏度降低，并且检测时间较长，不适合痕/微量羊血清白蛋白的检测。目前，关于检测鸡血清白蛋白的特异性方法报道较少。

发明内容

技术问题：本发明的目的是提供一种鸡血清白蛋白检测试剂盒，给出一种采用本试剂盒可以克服现有技术缺点的鸡血清白蛋白的鉴定和含量测定的方法。该试剂盒给出了检测鸡血清白蛋白的标准物质和对含血清白蛋白样品进行酶解反应的反应试剂。可将标准物质和/或酶解反应产物(或含内标物质)注入(超)高效液相色谱-质谱仪中进行鸡血清白蛋白含量测定。本发明提供了一种专属性强、精密度高、结果准确可靠、操作简便，可在临床上用于样品中鸡血清白蛋白含量测定的一种检测试剂盒及检测方法。

技术方案：

一种可实现鸡血清白蛋白鉴定及绝对定量的试剂盒，其特征在于：包括标准物质：

标准物质包括特征肽段及其内标肽段，肽段序列为：

选择方式如下：

(1)所述标准物质特征肽段单独使用，或与其他特征肽段配成两种或三种混合特征肽段使用；

(2)内标肽段单独使用，或与其他特征肽段配成两种或多种混合内标物质使用。

(3)所述标准物质特征肽段与其内标肽段配成的内标物质，是单一内标物质、双混合内标物质或三混合内标物质，使用其中的一种、两种或三种；

(4)、内标肽段与其他内标肽段配成两种或多种混合使用。

该试剂盒还包括反应试剂：

反应试剂，由以下成分组成