[发明专利]一种利用分子标记辅助选育中等粒重类型水稻的方法有效
申请号: | 201611060343.2 | 申请日: | 2016-11-23 |
公开(公告)号: | CN106755325B | 公开(公告)日: | 2019-06-04 |
发明(设计)人: | 梁燕;季芝娟;曾宇翔 | 申请(专利权)人: | 中国水稻研究所 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;A01H1/02;A01H1/04 |
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地址: | 310006 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 粒重 分子标记辅助 分子标记基因 基因型 带型 单株 扩增 水稻 分离群体 分子标记 粒重性状 水稻育种 育种效率 构建 聚合 育种 体内 杂交 检测 | ||
1.一种利用分子标记辅助选育中等粒重类型水稻的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将水稻品种Lemont与水稻品种扬稻4号杂交并构建分离群体Fn(n≥2);
(2)用4个分子标记D140A、D456、D746、D1048分别PCR扩增步骤(1)获得的分离群体内的不同单株的叶片DNA;
(3)利用步骤(2)所述的4个分子标记分别检测步骤(1)描述的分离群体内的不同单株,追踪4个与水稻粒重有关的数量性状基因座位(QTL);其中标记D140A定位于水稻第1染色体,用于追踪水稻第1染色体上与粒重有关的QTL:qGW-1YD;标记D456定位于水稻第4染色体,用于追踪水稻第4染色体上与粒重有关的QTL:qGW-4LE;标记D746定位于水稻第7染色体,用于追踪水稻第7染色体上与粒重有关的QTL:qGW-7LE;标记D1048定位于水稻第10染色体,用于追踪水稻第10染色体上与粒重有关的QTL:qGW-10LE;将标记D140A扩增出的与扬稻4号带型相同的分子标记基因型命名为A,将标记D456扩增出的与Lemont带型相同的分子标记基因型命名为B,将标记D746扩增出的与Lemont带型相同的分子标记基因型命名为C,将标记D1048扩增出的与Lemont带型相同的分子标记基因型命名为D;
(4)选择步骤(1)描述的分离群体内聚合步骤(3)描述的A、B、C、D全部4个基因型的单株以获得平均千粒重最小的水稻材料;选择步骤(1)描述的分离群体内聚合步骤(3)描述的A、B、C、D四个基因型中的任意3个基因型的单株以获得平均千粒重比聚合A、B、C、D全部4个基因型的单株更大的水稻材料;选择步骤(1)描述的分离群体内聚合步骤(3)描述的A、B、C、D四个基因型中的任意2个基因型的单株以获得平均千粒重较聚合A、B、C、D四个基因型中的任意3个基因型的单株更大的水稻材料;选择步骤(1)描述的分离群体内携带步骤(3)描述的A、B、C、D四个基因型中的任意1个基因型的单株以获得平均千粒重较聚合A、B、C、D四个基因型中的任意2个基因型的单株更大的水稻材料;
(5)将聚合步骤(4)描述的不同数目的基因型的单株自交多代,以获得不同千粒重的水稻纯合材料。
2.根据权利要求1所述的利用分子标记辅助选育中等粒重类型水稻的方法,其特征在于,所述步骤(1)中,将Lemont与扬稻4号进行杂交,可选择Lemont作为母本扬稻4号作为父本,也可以选择扬稻4号作为母本Lemont作为父本进行杂交。
3.根据权利要求1所述的利用分子标记辅助选育中等粒重类型水稻的方法,其特征在于,所述步骤(2)中,利用4个分子标记D140A、D456、D746、D1048来PCR扩增步骤(1)描述的分离群体内的单株的数目,应根据育种实际需要确定;以F2群体为例,要想在步骤(4)筛选获得1株携带A、B、C、D全部4个基因型的单株,理论上应检测不少于256个单株(计算方法为4×4×4×4=256),又例如,要想在步骤(4)筛选获得1株携带A、B、C、D四个基因型中的3个基因型的单株,理论上应检测不少于64个单株(计算方法为4×4×4=64);以上例子只是理论上的推测,在实际检测过程中,应该根据实际需要确定检测的单株数目;总的来说,检测的单株数目越多,则获得步骤(4)描述的不同要求的单株的机会才越大。
4.根据权利要求1所述的利用分子标记辅助选育中等粒重类型水稻的方法,其特征在于,所述步骤(3)中,分子标记基因型A的带型与利用标记D140A在扬稻4号上PCR扩增再通过8%浓度的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测到的带型相同,但A并不是qGW-1YD的基因型,由于D140A与qGW-1YD基因连锁,可间接通过选择A的基因型来选择qGW-1YD的基因型;同理可根据D456与qGW-4LE连锁而通过间接选择B基因型来选择qGW-4LE的基因型;根据D746与qGW-7LE连锁而通过间接选择C基因型来选择qGW-7LE的基因型;根据D1048与qGW-10LE连锁而通过间接选择D基因型来选择qGW-10LE的基因型。
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