[发明专利]一种绿茶降血糖肽的制备方法及其应用

权利要求书

1.具有降血糖活性的绿茶多肽在制备降血糖药物或具有降血糖功能的茶叶功能性食品方面的应用,其特征在于，所述绿茶多肽的制备方法如下：

采用蛋白酶催化水解绿茶蛋白生成具有降血糖活性的多肽片段，具体步骤如下：

S1.破壁：采用酶解技术，利用复合植物水解酶对绿茶茶渣进行酶解破壁处理；

S2.碱提：步骤S1酶解后的绿茶茶渣继续采用碱法提取茶蛋白，得到绿茶蛋白提取液；

S3.酸沉：对S2所得绿茶蛋白提取液进行酸沉，得沉淀物；

S4.脱盐：对S3所得沉淀物进行脱盐；

S5.脱色：取S4脱盐后的绿茶蛋白，利用85％丙酮进行脱色，冷冻干燥得到绿茶蛋白；

S6.酶解：取S5所得的绿茶蛋白加入酸性蛋白酶进行酶解，得到具有降血糖活性的绿茶多肽。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述绿茶茶渣为绿茶茶叶、绿茶茶渣、浸提后的废弃绿茶茶渣中的一种。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述酸性蛋白酶为和氏璧酸性蛋白酶(Acid protease)。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述复合植物水解酶为诺维信复合植物水解酶Viscozyme L；步骤S1所述酶解的参数为：酶浓度为2.0～3.0％，固液比为1:30～1:40，酶解pH为2.0～3.0，酶解温度为40～50℃，酶解时间为2.5～3h。

5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，步骤S2所述碱提的参数为：碱液浓度为0.10～0.20mol/L，固液比为1:20～1:40，提取温度为85～95℃，提取时间为1～3h；离心得到绿茶蛋白提取液。

6.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，步骤S3所述酸沉是取绿茶蛋白提取液，用稀盐酸调节pH为2.5～3.5，静置30～60min后离心，得到沉淀物；步骤S4所述脱盐是在沉淀物中加入水混匀，注入透析袋中，置于纯水中透析36～48h，期间更换纯水4～6次，直至透析袋外水无色且电导率接近纯水，然后3500～4000r/min离心15～20min得到脱盐后的绿茶蛋白。

7.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，步骤S5所述脱盐后的绿茶蛋白和85％丙酮的用量比为：固液比1：4～1：6；步骤S5所述脱色的方法是：取S4脱盐后的绿茶蛋白，加入85％丙酮，震荡15～20min，离心弃上清，重复数次，用纯水洗涤并离心，重复数次以洗净丙酮，得到绿茶蛋白。

8.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，步骤S6所述酶解的参数为：酶浓度为2.5～3.5％，酶解pH为2.0～5.0，酶解温度为40～58℃，酶解时间为2.5～3h。