[发明专利]一种NADPH的纯化工艺

权利要求书

1.一种NADPH的纯化工艺，其特征在于：所述工艺依次包括以下步骤：

A、预处理：将生物催化法制备得到的NADPH粗产物过微滤膜，所述微滤膜为0.1-0.5μm孔径的中空纤维膜；

B、上离子柱：将步骤A微滤后的NADPH粗产物上大孔型苯乙烯系季胺I型强碱性阴离子交换树脂柱；

C、阳离子洗脱：上样完成后用纯水淋洗离子柱至洗脱液中不含阳离子；

D、前杂洗脱：用0.07-0.5mol/L氯化钠溶液淋洗离子柱至洗脱液中不含在260nm波长处有紫外吸收的物质；

E、产品洗脱：用含有0.5mol/L氯化钠、体积百分比为7％的乙醇的水溶液淋洗离子柱，收集在340nm波长处有紫外吸收的洗脱液；

F、步骤E的洗脱液经浓缩、干燥处理后即得纯化后的NADPH成品。

2.根据权利要求1所述的NADPH的纯化工艺，其特征在于：所述NADPH粗产物的上样量以NADPH计为9-15g/g阴离子交换树脂。

3.根据权利要求1或2所述的NADPH的纯化工艺，其特征在于，当所述NADPH粗产物的pH值较低时，所述工艺还包括：在步骤A之前，将所述NADPH粗产物的pH值调至8.0-11.0。

4.根据权利要求3所述的NADPH的纯化工艺，其特征在于，当所述NADPH粗产物的pH值较低时，所述工艺还包括：在步骤A之前，将所述NADPH粗产物的pH值调至9.0-10.0。

5.根据权利要求1或2所述的NADPH的纯化工艺，其特征在于，所述工艺还包括对所述阴离子交换树脂的如下预处理步骤：用氢氧化钠溶液浸泡所述阴离子交换树脂，然后用纯水淋洗至偏中性。

6.根据权利要求1或2所述的NADPH的纯化工艺，其特征在于：所述工艺还包括将所述阴离子交换树脂再生的步骤，再生过程中所使用的再生液为含有1.0mol/L氯化钠、0.1mol/L盐酸的水溶液，淋洗速度为0.8-1.5BV/H，再生液用量为2.0BV，再生后用纯水冲洗树脂至偏中性。

7.根据权利要求1或2所述的NADPH的纯化工艺，其特征在于：步骤C和步骤D中全程采用核酸蛋白检测仪进行检测，所述洗脱液的收集方式为从所述核酸蛋白检测仪的读数开始上升时开始收集，待读数开始下降时停止收集。

8.根据权利要求1或2所述的NADPH的纯化工艺，其特征在于：所述浓缩处理依次包括微滤、超滤和纳滤，所述微滤处理使用0.1-0.5μm孔径的中空纤维膜，所述超滤处理使用截留分子量为10K的超滤膜，所述纳滤处理使用截留分子量为100-400的卷式膜。

9.根据权利要求1或2所述的NADPH的纯化工艺，其特征在于：所述干燥处理为真空冷冻干燥。