[发明专利]一种紫杉醇超声波提纯方法在审
申请号: | 201710231563.5 | 申请日: | 2017-04-11 |
公开(公告)号: | CN107400104A | 公开(公告)日: | 2017-11-28 |
发明(设计)人: | 李光杰;叶波;林茂;毛剑秋 | 申请(专利权)人: | 浙江大德龙生物技术有限公司 |
主分类号: | C07D305/14 | 分类号: | C07D305/14 |
代理公司: | 长沙星耀专利事务所(普通合伙)43205 | 代理人: | 许伯严 |
地址: | 323300 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 紫杉醇 超声波 提纯 方法 | ||
技术领域
本发明属于紫杉醇提纯技术领域,尤其涉及一种紫杉醇超声波提纯方法。
背景技术
红豆杉又名三尖杉、桃松、山榧树、广泛分布于世界各地,植物全株富含三尖杉碱、表三尖杉碱、去甲基三尖杉碱、乙酰三尖杉碱、三尖杉酮碱、三尖杉新碱以及紫杉醇,运用红豆杉极其同属植物短叶紫衫提取物的紫衫膏中含有多种成分:紫衫碱、紫杉醇、紫衫素、紫衫宁、蛇皮甾酮、金松双簧酮,某些有毒物质,糖苷色素等。其中紫杉醇的抗Ca、抗TB活性最佳,是紫衫浸膏中的主要抗Ca、抗TB成分和主要要用成分。
紫杉醇是源于红豆杉植物的一种天然的抗癌药物,具有独特的抗癌机理和确切的临床疗效,已经用于乳腺癌、卵巢癌、肺癌等癌症的临床治疗,虽然价格昂贵,但需求量却不断上升。早期,紫杉醇是从天然红豆杉树皮中提取获得的,而树皮中的含量仅为0.01~0.02%,生产少量的紫杉醇,就需要大量的红豆杉树皮。由于生产紫杉醇,天然红豆杉林遭到了严重的破坏。红豆杉植物属国家珍稀保护植物,为了保护红豆杉植物,国家严令禁止采集天然红豆杉植物用于生产紫杉醇。国内一些林场和一些有实力的公司对红豆杉进行了大规模的人工栽培,其小枝叶含有的紫杉醇量与树皮不相上下,可以修剪其枝叶作为提取紫杉醇的原料,从而避免了对红豆杉天然资源的破坏目前,紫杉醇的分离纯化工艺复杂,导致由红豆杉提纯紫杉醇的成本高,耗时长。
因此,发明一种紫杉醇超声波提纯方法显得非常必要。
发明内容
为了解决上述技术问题,本发明提供一种紫杉醇超声波提纯方法,以解决现有的紫杉醇提纯工艺复杂,生产成本高昂的问题。
本发明是利用超声波机械波的原理,作用于红豆杉植物枝叶粉末,使得中药材等植物细胞的细胞壁破碎,能使得细胞里面的有效成分溶解在提取液体中,提高所提取的成分的得率和纯度,常温提取不破坏植物活性成分,缩短溶解时间,利用硫酸铝钾在乙醇溶液中形成氢氧化铝沉淀的物理吸附作用,可吸附混合液体中的紫杉醇,实现固液分离,所得液体可循环使用,环保节能不会造成污染,便于进行分离提取,用易溶解的有机溶剂把氢氧化铝吸附的紫杉醇洗脱下来,使无水乙醇提取液中的紫杉醇与大量杂质得到初步分离。
本发明的实现方法如下:
粉碎:(1)将红豆杉植物的枝叶放入粉碎机粉碎成颗粒大小为50-100目的粉末,然后利用食品用风干机进行干燥,干燥后红豆杉粉末含水量为10-20%;
发酵:(2)向红豆杉植物粉末中加入浓度为60%的乙醇溶液,乙醇溶液的加入量为红豆杉粉末重量3-5倍,利用混合搅拌机进行混合搅拌,搅拌时间为 0.5-1.2小时,并将所得的混合物投入发酵罐体中密封发酵,发酵时间24-36小时,发酵温度30-40℃;
超声振荡:(3)将红豆杉粉末混合物放入干净的容器中,将盛有混合物的容器放入超声波清洗机的清洗水槽中,清洗介质:纯净水,清洗介质的加热温度35-45℃,超声波振荡频率为30-40KHz,振荡时间1-2小时;
过滤、脱色:(4)对混合物静置分层、过滤,提取混合液,让得到的滤液通过活性炭柱,进行脱色,得到脱色液,再用浓度为60%的乙醇溶液进行萃取,
提纯:(5)向脱色后的混合液体内部加入硫酸铝钾,形成的白色的氢氧化铝胶体吸收掉混合液中紫杉醇,生成了含紫杉醇胶体和不含紫杉醇的溶液;
干燥、浓缩:(6)将得到的吸附有紫杉醇的氢氧化铝胶体进行干燥,制成颗粒大小80-100目的颗粒,利用重量为氢氧化铝胶体10-15倍的无水乙醇溶液洗脱含紫杉醇的氢氧化铝胶体,将得到的洗脱液进行减压浓缩。
与现有技术相比,本发明具有如下有益效果:本发明采用超声波振荡加速红豆杉植物细胞内有效成分的溶解,提高提纯加工效率,利用硫酸铝钾在乙醇溶液中形成氢氧化铝沉淀的物理吸附作用,可吸附混合液体中的紫杉醇,实现固液分离,便于提纯、浓缩,简化了萃取步骤,紫杉醇的萃取成本低,效率高,洗脱率高达90%以上。
具体实施方式
以下对本发明做进一步描述:
实施例:
本发明提供一种紫杉醇超声波提纯方法,其特征在于,其制备步骤为:
粉碎:(1)将红豆杉植物的枝叶放入粉碎机粉碎成颗粒大小为50-100目的粉末,然后利用食品用风干机进行干燥,干燥后红豆杉粉末含水量为10-20%;
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