[发明专利]治疗或预防气喘的有效成分、含有该有效成分的组合物及其用途

说明书

技术领域

本发明是涉及一种抑制气喘相关症状的活性物质、含有该有效成分的组合物及其用途，特定而言，所述包含所述活性物质可用于制备预防或治疗气喘的药剂。

背景技术

气喘是一种常见的呼吸道的慢性炎症性疾病，主要特征是多变和复发的症状、可逆性气流阻塞，和支气管痉挛。常见症状表现为喘息、咳嗽、胸腔紧迫胸闷和气短。

针对气喘的治疗，目前仍以药物治疗为主：如类固醇和抑制肥大细胞释放发炎物质的药物、气管扩张剂和免疫疗法等。然而，包括抗发炎药物和气管扩张剂在内的药物治疗仍无法真正的改变过敏免疫反应，仅为一种治标的方法。

另一方面，减敏疗法虽能改变过敏免疫体质，但是通常需要较长的一段时间，且有时会出现一些副作用，并非所有的病人都能够使用。

甘油醛-3-磷酸脱氢酶(Glyceraldehyde 3-phosphate Dehydrogenase，G3PDH)是自由加氏乳酸杆菌(Lactobacillus gasseri)PM-A0005菌株(简称“PM-A0005菌株”)所分离纯化而来。根据先前研究，发现甘油醛-3-磷酸脱氢酶具有抗过敏活性，可降低个体过敏反应，因而可开发为治疗或预防过敏性疾病的药剂，例如气喘。但未进一步探悉其活性部位。

发明内容

本发明基于发现甘油醛-3-磷酸脱氢酶(Glyceraldehyde 3-phosphate Dehydrogenase，G3PDH)具有抗过敏活性，可降低个体气喘反应，因此进一步探讨其调节免疫系统、抑制气喘症状的功效和更明确的活性部位，开发其中活性部位为治疗或预防气喘的药剂。

因此，本发明提供一种重组蛋白PMA5P20，具有SEQ ID NO：7所示的氨基酸序列或由SEQ ID NO：8所示的DNA序列编码的氨基酸序列。

本发明提供一种本发明重组蛋白PMA5P20或其具相同功能的变异体或更小片段用于制备治疗或预防气喘药剂的用途。

根据本发明实施例，甘油醛-3-磷酸脱氢酶是选自由加氏乳酸杆菌(Lactobacillus gasseri)PM-A0005菌株(简称"PM-A0005菌株")和其萃取物、区分物、次区分物或有效成分所组成的群组；其中所述PM-A0005菌株为具有与寄存于台湾新竹食品工业发展研究所寄存编号BCRC 910304菌株功能相同的性质。

根据本发明实施例，是以pET303/CT-PMA5P40-His表达载体为模板，设计3组RCR引物制作出3段约20kD蛋白质片段，分别为PMA5P40-Frag-1、PMA5P40-Frag-2、和PMA5P40-Frag-3，其中PMA5P40-Frag-3有较好的抑制过敏、气喘效果，并命名为PMA5P20。其中PMA5P40具有氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，其DNA序列如SEQ ID NO：2所示。PMA5P40-Frag-1具有氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示，其DNA序列如SEQ ID NO：4所示。PMA5P40-Frag-2具有氨基酸序列如SEQ ID NO：5所示，其DNA序列如SEQ ID NO：6所示。PMA5P40-Frag-3(PMA5P20)具有氨基酸序列如SEQ ID NO：7所示，其DNA序列如SEQ ID NO：8所示。

根据本发明实施例，重组蛋白PMA5P20可有效诱发小鼠树突细胞表达IL12p40、IL-10和刺激脾脏细胞表达IFN-γ，显示其具有刺激免疫细胞、调节免疫反应的功效。此外，重组蛋白PMA5P20对尘螨致敏小鼠具有改善呼吸系统阻力、降低气管壁增厚、减少肺泡细胞浸润、抑制支气管内淋巴球增加、和调控发炎因子的功效。因此，本发明提供重组蛋白PMA5P20或其具相同功能的变异体或片段用于制备降低个体气喘反应药剂的用途。

本发明的各种具体实施例于下文详述。本发明的其他特征将可由下文有关该等各种具体实施例的详细叙述、图式和权利要求而清楚呈现。

附图说明

在本发明中所呈现的较佳具体实施例图示是以阐述本发明为目的。应被理解的是，本发明并不局限于所示的较佳具体实施例。数据以平均值±SD表示之。其中*：P<0.05、**：P<0.01、***：P<0.001(Student’s t-test)。

图式中甘油醛-3-磷酸脱氢酶以命名的PMA5P40表示，在小鼠气喘模型实验中PMA5P40-Frag-3以PMA5P20表示。