[发明专利]一株枯草芽孢杆菌菌株及其在降解油桐饼粕蛋白中的应用

说明书

本发明公开了一株枯草芽孢杆菌菌株，所述短杆菌菌株保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No.60153，保藏日期为2017年3月28日，命名为枯草芽孢杆菌LYT‑1。该菌株可用于制备降解油桐饼粕制剂，制备油桐饼粕发酵菌剂，制备抗病原真菌制剂。

技术领域

本发明属于微生物工程技术领域，具体涉及一株降解油桐饼粕的枯草芽孢杆菌菌株及其应用。

背景技术

油桐是我国本土的木本油料树种。油桐具有生长快，产量高，适应性广，种子含油率高且营养丰富等优点。桐籽榨油后的桐饼，含有氮4％～6％，P₂O₅ 1.8％～2.7％，K₂O1.2％～1.3％，还有大量其它微量元素，是一种优良的蛋白资源。但由于油桐饼粕含有毒素，为皂角甙和佛波醇及其相关化学物质，因而油桐饼粕长久以来多作为饼肥还田使用。

随着农业现代化的发展，高养分且使用简便的化肥逐渐取代了历史悠久的有机肥。随之而来的是各种农业和环境问题：土壤养分流失、肥力下降，环境污染加剧，作物抗病虫害能力减弱，资源浪费等等。桐粕肥料化不仅有助于解决世界各地的肥源不足问题，有益于生物肥的多样性，而且能够在一定程度上规避对于化学肥料的依赖。但是油桐饼粕作为肥料直接施用或者堆积发酵后施用，不仅肥效慢，而且桐粕中的营养物质不能充分利用造成资源浪费。

枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)是一类革兰氏阳性杆状好氧型细菌，可以产生内生芽孢，其适应能力强，应用性广。并且细菌本身没有致病性，对环境和人畜无害，对抗生素不会产生耐药性。枯草芽孢杆菌可产生蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶等多种消化酶，并且在形成芽孢过程中可分泌多种抗生素，对一些植物病害具有拮抗作用。因此，枯草芽孢杆菌是一种理想的生物有机肥和饲料发酵菌种。

发明内容

本发明的目的之一在于提供一株枯草芽孢杆菌LYT-1及其在降解油桐饼粕中的应用，本发明的枯草芽孢杆菌能够耐受油桐饼粕毒素并有效降解油桐饼粕蛋白质。

本发明所提供的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)命名为枯草芽孢杆菌LYT-1，该菌株已于2017年3月28日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，(简称GDMCC，保藏单位地址：广州市先烈中路100号省微生物所实验楼五楼，邮编：510070)，保藏编号为 GDMCC No:60153。

本发明所提供的枯草芽孢杆菌LYT-1的特征如下：

1)菌落特征：菌落呈污白色，圆形和椭圆，表面粗糙且不透明，边缘不整齐。

2)革兰氏染色：杆状，呈蓝紫色，为革兰氏阳性菌。

3)生理生化鉴定结果如表1所示：

表1枯草芽孢杆菌LYT-1生理生化试验结果

4)16S rDNA序列分析：

本发明的枯草芽孢杆菌LYT-1，其16S rDNA序列在NCBI数据库中用BLAST进行同源性分析，得到相似性较高的序列，运用MEGA6.06软件构建系统发育树；该芽孢杆菌 LYT-1的16S rDNA序列与枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的同源性达到99％。

枯草芽孢杆菌LYT-1具有耐受油桐饼粕毒素的能力。

枯草芽孢杆菌LYT-1具有高效降解油桐饼粕蛋白质的能力。

枯草芽孢杆菌LYT-1具有抑制植物病原真菌的能力，所述真菌为立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)。

枯草芽孢杆菌LYT-1具有促生作用，所述促生作用为解磷作用。