[发明专利]一株产朊假丝酵母及其在发酵产蛋白中的应用

说明书

本发明公开了一株产朊假丝酵母及其在发酵产蛋白中的应用，所述菌株分类命名为产朊假丝酵母（Candida utilis）YHC‑007，已保藏于中国典型培养物保藏中心CCTCC，保藏编号：CCTCC NO：M 2017403。所述菌株可大幅度提高发酵产物中蛋白的产量，并且遗传稳定性好，连续传代5次后效价并无明显改变。在500L发酵罐中，发酵产量几乎没有下降。本发明菌株完全符合工业化发酵生产蛋白的技术指标，可用于工业化发酵生产，有重大的社会科研意义和经济价值。

技术领域

本发明涉及一株产朊假丝酵母及其在发酵产蛋白中的应用，属于微生物发酵技术领域。

背景技术

酵母是一类繁殖较快的微生物，往往在1~3h就可以扩繁一倍，同时酵母的发酵底物也比较广，包括如糖蜜等各种低成本原料。在发酵的终产物中，每克活性酵母可达200亿以上 , 其蛋白质质量含量一般低于50%。因此，利用酵母的快速繁殖能力和高蛋白特性,生产廉价的蛋白饲料受到人们的关注。

我国开发研究生物饲料蛋白已有多年历史,利用秸秆、鼓皮、酒糟等废弃物生产生物酵母蛋白，近年来研究者们也采用氨基酸废液来生产酵母蛋白; 国外(日本、俄罗斯等)虽然有研究报道, 但也尚未见工业化生产。

本发明菌株采用的离子束诱变育种是一种交叉物理学和生物学的新型诱变方式，和经典诱变方法相比，在遗传稳定性，诱变频率性上有巨大优势。同时采用糖蜜、玉米浆等工业废弃原材料进行发酵，最终获得的假丝状酵母蛋白质质量含量可达75%，发酵时间缩短到24h以内，大大优于国内外相关生产标准。

经过相关文献、专利的检索，国内外利用这一思路筛选低产朊假丝酵母发酵产高蛋白的相关技术和方法尚无报道。

发明内容

本发明的目的是提供一株产朊假丝酵母及其在发酵产蛋白中的应用，诱变方法简单、高效、安全，相较于出发菌种，发酵周期短，蛋白质质量含量大大提高，达到75%以上，同时减少生产成本，简化生产工艺。

为了达到上述目的，本发明采用的技术方案如下：

一株产朊假丝酵母，其分类命名为产朊假丝酵母（Candida utilis）YHC-007，已于2017年 6月 30日保藏于中国典型培养物保藏中心CCTCC，地址：中国 武汉 武汉大学，保藏编号：CCTCC NO：M2017403。

本发明所述的产朊假丝酵母的筛选方法是：将土壤中筛选的的产朊假丝酵母细胞悬浮液经低能氮离子注入诱变后，通过平板筛选出生长状况良好的菌株，再通过摇瓶发酵复筛获取作为下一轮诱变的出发菌株，重复上述诱变过程，最后筛选出符合工业应用的目标菌株产朊假丝酵母YHC-007。

本发明菌株的形态学及生理化学特征如下：

菌落颜色：乳白色；

需氧方式：兼性好氧；

菌落大小：3~8μm；

适宜生长温度：28~35℃；

适宜生长pH：6.0~7.0；

菌落形态：椭圆形；

革兰氏染色：阴性。

本发明所提供的产朊假丝酵母筛选诱变方法，具体步骤如下

（a)、细胞悬浮液制备：将平板上培养的产朊假丝酵母制成细胞悬液，调整浓度为10⁶/毫升。

（b)、低能氮离子注入诱变：取0.1 mL的步骤(a)中细胞悬浮液均匀涂布于无菌平皿上，以无菌风吹干，在20~30 KeV，注入剂量为5.0×10¹⁴~25.0×10¹⁴ ions/cm³下对其进行氮离子注入。