[发明专利]CBF‑AMLc‑kit基因突变检测用的PCR扩增引物、试剂盒及检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及分子生物学领域，尤其是涉及一种CBF-AML c-kit基因突变检测用的PCR扩增引物、试剂盒及检测方法。

背景技术

CBF-AML(Core binding factor acute myeloid leukemia，核心结合因子急性髓细胞样白血病)是指伴随有t(8；21)(q22；q22)或inv(16)(p13.1；q22)/t(16；16)(p13.1；q22)重现性遗传学异常的AML(Acute myeloid leukemia，急性髓细胞样白血病)，约占全部AML的15％。一般认为CBF-AML患者有较好的预后，但仅有50％的患者可被治愈，CBF-AML患者预后状况的不同与病人个体之间的基因异质性具有较大的关系。

c-kit基因定位于人类染色体4q11-12，为原癌基因，编码145kD的跨膜蛋白，隶属于第Ⅲ类酪氨酸激酶受体家族。在约有30％的AML患者中存在c-kit基因的获得性突变，主要发生于exon 8和17。研究发现，c-kit基因的突变与AML患者的不良预后密切相关，尤其是发生于exon 17上的突变。c-kit基因的突变研究对CBF-AML患者预后具有重要的参考意义。

发明内容

基于此，有必要提供一种CBF-AML c-kit基因突变检测用的PCR扩增引物、试剂盒及检测方法。

一种CBF-AML c-kit基因突变检测用的PCR扩增引物，包括第一扩增引物对和/或第二扩增引物对；其中，所述第一扩增引物对中两条引物的序列分别如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示，所述第二扩增引物对中两条引物的序列分别如SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示。

第一扩增引物对和第二扩增引物对的详细信息见下表。

在其中一个实施例中，所述CBF-AML c-kit基因突变检测用的PCR扩增引物包括所述第一扩增引物对和所述第二扩增引物对。

一种CBF-AML c-kit基因突变检测用的试剂盒，含有上述任一实施例所述的PCR扩增引物。

在其中一个实施例中，所述PCR扩增引物在扩增体系中的使用浓度是10μM。

当所述PCR扩增引物包括第一扩增引物对和第二扩增引物对时，两个扩增引物对分别制成扩增引物试剂，也即扩增引物试剂有两种，分别是含有第一扩增引物对的第一扩增引物试剂和含有第二扩增引物对的第二扩增引物试剂，每种扩增引物试剂中均含有相应的两条引物，浓度均为100μM。扩增引物试剂可存放于-20℃环境中，在使用时配制成引物浓度为10μM的溶液，于4℃保存即可。

在其中一个实施例中，所述CBF-AML c-kit基因突变检测用的试剂盒还含有测序引物对，所述测序引物对中两条引物的序列分别如SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示。

测序引物对的详细信息见下表。

引物名称引物序列(5’→3’)SEQ ID NO:M13FTGTAAAACGACGGCCAGT5M13RCAGGAAACAGCTATGACC6

在其中一个实施例中，所述测序引物对在扩增体系中的使用浓度是10μM。

测序引物对可制成测序引物试剂的形式，存放于-20℃环境中，在使用时配制成引物浓度为10μM的溶液，于4℃保存即可。