[发明专利]一种依折麦布对映异构体的区分检测方法

说明书

本发明公开了一种依折麦布对映异构体的区分检测方法，采用β‑环糊精与Cu离子作为配体，用于与依折麦布(S，R，S)、(R，S，R)形成不同稳定形态的络合物，并利用质谱法对其进行识别区分。本发明极大地缩短了依折麦布对映异构体(S，R，S)、(R，S，R)检测时间，将对映异构体(S，R，S)、(R，S，R)的分析时间缩短至2‑3min，简便了操作过程，并且区分重复性非常好；区分所需样品量极少，只需200μl左右，成本很低。本发明为该药物对映异构体区分提供了更好的方法，同时为区分难度较大的多手性中心对映异构体的分析提供了新的思路。

技术领域

本发明涉及药物分析技术领域，具体涉及一种依折麦布对映异构体(S，R，S)、(R，S，R)的区分检测方法。

背景技术

依折麦布为胆固醇抑制吸收剂，适用于治疗原发性高胆固醇血症，纯合子家族性高胆固醇血症(HoFH)和纯合子谷甾醇血症(或植物甾醇血症)，其分子式为C₂₄H₂₁F₂NO₃，化学名为1-(4-氟苯基)-3(R)-[3-(4-氟苯基)-3(S)-羟丙

基]-4(S)-(4-羟苯基)-2-吖丁啶(氮杂环丁烷)酮，结构式为：

该分子中含有3个手性中心，存在多个光学异构体，对于依折麦布的光学异构体杂质，在药物合成过程当中须进行质量控制。含手性碳原子的光学异构体的区分一直是手性药物合成和制剂过程中质量控制的难点，实现依折麦布及其光学异构体的区分在依折麦布药物的合成和制剂过程的质量控制方面具有现实意义。对于多手性中心的分子，非对映异构体区分难度低，对映异构体区分难度较大，因此对该类药物对映异构体区分方法的研究具有重要意义。

目前，常用的依折麦布对映异构体的区分方法是传统的色谱法，如LC、HPLC、CE、CEC、SFC等，但是这些方法都需要较长的区分时间和较大的样品量，对实际操作带来了不便。质谱具有快速、准确、灵敏的特点，自1977年首次用于手性异构体的区分后，现今已经得到了极大的发展，主要的区分手性异构体的方法包括质谱法和串联质谱法。前者又包括主-客体法、离子-分子反应法及非对映异构体解离法。目前用质谱法来区分依折麦布对映异构体还未见文献报道。

发明内容

本发明目的是提供一种依折麦布对映异构体(S，R，S)、(R，S，R)的区分检测方法，以解决现有技术的不足。

本发明采用以下技术方案：

一种依折麦布对映异构体的区分检测方法，采用β-环糊精与Cu离子作为配体，用于与依折麦布(S，R，S)、(R，S，R)形成不同稳定形态的络合物，并利用质谱法对其进行识别区分。

进一步地，β-环糊精终浓度为20-25μg/ml；配置时先加少量DMSO至β-环糊精全部溶解，再用甲醇稀释待用。

进一步地，Cu离子为二价，终浓度为12-12.5μg/ml；配置时用蒸馏水作为溶剂。

进一步地，质谱的进样方法为针泵直接进样，防止络合物在进行碰撞解离之前就被外界环境影响。

进一步地，针泵直接进样的流速为20μl/min，收集时间为1min，质谱真空温度为250℃，荷质比范围设置300-2000。

进一步地，在质谱中进行二级质谱实验时，直接输入目标母离子[Cu(Ezetimibe)₂(β-CD)]²⁺的荷质比(m/z＝1007.8)进二级质谱，将碰撞能量调为0来寻找母离子。

进一步地，进行二级质谱实验时碰撞能量为14-16，收集时间为40ms。

本发明的有益效果：