[发明专利]一种含枯草芽孢杆菌及壳聚糖的土壤调理剂

说明书

本发明利用枯草芽孢杆菌在虾蟹壳固态培养基上生长，利用虾蟹壳为营养素和载体发酵，并降解虾蟹壳，产生壳聚糖，作为活菌型土壤调理剂。所述枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌BSh0851。优势在于本项目所发明的土壤调理剂具有以下功效：（1）BSh0851枯草芽孢杆菌具有显著抑制病原菌的活性；（2）虾蟹壳具有丰富的矿物质和土壤疏松性；（3）壳聚糖具有抑菌功能。

技术领域

本发明属于土壤调理剂，具体涉及一种含枯草芽孢杆菌及壳聚糖的土壤调理剂，应用在土壤板结、营养不良和病菌较多的田间。

背景技术

在我国，土壤资源非常有限，相当比例的土壤因为成土原因或人为原因导致具有障碍因子。例如，侵蚀、质地不良、结构差、盐碱化、水分不足、肥力不足或病虫害多等。土壤调理剂可以分为天然来源，主要利用固体废弃物制得，例如高炉渣、城市污泥、秸秆、木屑、禽畜类粪便、发酵下脚料、鱼产品加工下脚料等；人工提取或合成的高分子聚合物，例如壳聚糖、腐殖酸、聚丙烯酸、聚乙二醇等高分子聚合物；生物制剂类，例如生物控制剂、菌根、微生物接种菌等。

本发明创新地将天然来源的虾蟹壳废料、壳聚糖和微生态制剂三方面结合起来，制成功能全面的土壤调理剂。

发明内容

本发明的主要发明内容在于提供一种枯草芽孢杆菌降解虾蟹壳的微生态土壤调理剂及其固态培养基配方，为新型活菌土壤调理剂提供新的技术。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

本发明中所述枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtulis）BSh0851，保藏日期为2009年12月13日，保藏单位是中国微生物菌株保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址是中国科学院微生物研究所，保藏号为CGMCC No.3502。该菌株具有降解虾蟹壳几丁质作用和显著抑制病原菌的活性。

所述枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）为革兰氏阳性菌，芽孢椭圆到柱状，位于菌体中央或稍偏，芽孢形成后菌体不膨大，菌落表面粗糙不透明，污白色或微黄色，常形成皱醭；需氧菌，可利用蛋白质、多种糖及淀粉，V-P阳性。

该菌株对各病原菌的抑菌率分别为西瓜炭疽病菌42.9%、烟草炭疽病菌72.3%、辣椒炭疽病菌31.3%、香蕉炭疽病菌41.7%、白菜炭疽病菌20.0%、黄瓜枯萎病菌43.5%、烟草赤星病菌28.6%、烟草灰霉病菌58.8%、康氏木霉菌38.0%。对植物病原细菌如：西瓜果斑病菌、辣椒疮痂病菌、烟草青枯病菌都有明显的抑菌作用。

表1. 枯草芽孢杆菌BSh0851对部分细菌的生长抑制作用

注：“+”越多代表抑菌效果越明显

本发明含枯草芽孢杆菌及壳聚糖的土壤调理剂的制备方法，具体包括以下步骤：

（1）种子液制备：将保藏于4℃冰箱的菌株取出，挑取一环菌接入100 mL牛肉膏蛋白胨固体培养基中，37℃，200r/min，培养1d；牛肉膏蛋白胨固体培养基：牛肉膏2.5g，氯化钠2.5g，蛋白胨5g，琼脂粉7.5g，蒸馏水500mL，pH7.0～7.2；

（2）固体发酵：在虾蟹壳粉固体发酵培养基中接入培养1 d的种子液20 mL，混合均匀，37℃静置培养6d，得到所述土壤调理剂；虾蟹壳粉固体发酵培养基配方为：虾蟹壳粉50g，水26mL，谷皮量9g，麦麸皮20g。

所制得的含枯草芽孢杆菌及壳聚糖的土壤调理剂中含有壳聚糖12mg/g，孢子或活菌含量在5×10⁸个/g。

本发明的有益效果如下：