[发明专利]一种产气荚膜梭菌ε毒素重组亚单位疫苗及其生产方法有效
| 申请号： | 201710981995.8 | 申请日： | 2017-10-20 |
| 公开（公告）号： | CN107753940B | 公开（公告）日： | 2021-02-02 |
| 发明（设计）人： | 陈小云;杜吉革;朱真;薛麒;王磊;印春生;李启红;康凯;姚文生 | 申请（专利权）人： | 中国兽医药品监察所 |
| 主分类号： | A61K39/08 | 分类号： | A61K39/08;A61K39/39;A61P31/04;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京君智知识产权代理事务所(普通合伙) 11305 | 代理人： | 郑明 |
| 地址： | 100081 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 荚膜 毒素 重组 单位 疫苗 及其 生产 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种产气荚膜梭菌ε毒素重组亚单位疫苗，其特征在于所述疫苗含有采用大肠埃希氏菌表达的重组产气荚膜梭菌ε毒素蛋白；
所述重组产气荚膜梭菌ε毒素蛋白野生型产气荚膜梭菌ε毒素成熟毒素相比，含有3个氨基酸突变，分别为第30位酪氨酸突变为丙氨酸，第106位组氨酸突变为脯氨酸，以及第196位酪氨酸突变为丙氨酸；其C端含有6组氨酸(6His)标签；
所述重组产气荚膜梭菌ε毒素蛋白的基因序列按照大肠杆菌经过密码子优化；
所述重组产气荚膜梭菌ε毒素蛋白为无毒突变体；
所述疫苗的制苗用菌种为重组表达产气荚膜梭菌ε毒素蛋白的大肠埃希氏菌，被命名为大肠埃希氏菌(Escherichia coli)BL21/mETX-HYY株，该菌株已于2017年09月21日送交北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号为：CGMCC No.14652。
2.如权利要求1所述产气荚膜梭菌ε毒素重组亚单位疫苗的制备方法，其特征在于用所述表达产气荚膜梭菌ε毒素重组蛋白的大肠埃希氏菌BL21/mETX-HYY株作为疫苗生产菌株，经发酵培养、诱导表达、菌体破碎、可溶性抗原蛋白分离纯化后，加双相油佐剂混合制成。
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