[发明专利]适用于电动-微生物协同修复石油烃污染土壤中混合菌剂及其制备和应用

说明书

本发明属于电动‑微生物协同修复石油烃污染土壤技术领域，具体涉及一种适用于电动‑微生物协同修复高盐度石油烃污染土壤中混合菌剂及其制备和应用。菌剂由仙河盐单胞菌、地衣芽孢杆菌及蜡样芽孢杆菌分别发酵混合获得；本发明组合菌剂应用于电动‑微生物协同修复技术中，打破修复过程中所形成的土壤高盐状态的修复瓶颈，合理利用功能菌剂资源，有效实现了石油土壤中石油烃的降解，降低土壤中石油烃有机污染物毒性。

技术领域

本发明属于电动-微生物协同修复石油烃污染土壤技术领域，具体涉及一种适用于电动-微生物协同修复高盐度石油烃污染土壤中混合菌剂及其制备和应用。

背景技术

石油经济的不断发展壮大致使石油烃的开采需求量逐年提高，由于开采落地、运输泄漏等原因进入土壤的石油烃类物质数量也随之不断增加，危害自然环境与生态安全。对此，针对石油污染土壤的治理修复工作迅速开展并得到越来越广泛的关注。目前，以生物及化学方法为主的石油烃污染土壤修复技术愈发受到青睐。然而，鉴于石油烃污染物的强疏水特性，单一的微生物修复技术难以实现高效稳定的石油烃降解效果，对此，通过单一处理技术的有机组合而形成的联合修复技术是实现石油污染土壤修复技术突破的有力方向。

电动修复技术作为一种近几年来愈加受到关注的有机污染土壤修复技术，是石油烃污染土壤修复的新希望。然而，电动修复技术亦存在修复效率“拖尾”的不利效应。对此，采用电动-微生物协同修复技术，以微生物修复为主体，通过电动修复过程实现微生物代谢的强化，将是快速启动石油烃污染物降解过程，并维持快速降解时段的有效手段。但目前，电动-微生物的协同修复技术依然存在土壤性质极端化的趋势，其中，电极端的“离子墙”现象所导致的高盐特征是该技术应用对土壤性质改变的显著特征之一。高盐特征产生盐胁迫作用，导致诸多微生物脱水而丧失繁殖代谢功能，乃至大量死亡，失去石油烃代谢活性。对此，选用高耐盐特性菌株将是适应盐渍土壤石油烃污染修复的可行方法之一。

发明内容

本发明目的在于提供一种适用于电动-微生物协同修复石油烃污染土壤中混合菌剂及其制备和应用。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：

一种适用于电动-微生物协同修复高盐度石油烃污染土壤中混合菌剂，菌剂由仙河盐单胞菌、地衣芽孢杆菌及蜡样芽孢杆菌分别发酵混合获得；仙河盐单胞菌保藏于中国普通微生物菌种保藏中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏号为CGMCCNO.1.6848，保藏日2008年9月15日，分类学命名Halomonas xianhensis；地衣芽孢杆菌及蜡样芽孢杆菌均保藏于中国典型培养物保藏中心，地址为武汉市武昌珞珈山，保藏登记号分别为CCTCC NO：M 2011261和M 2015705，保藏日分别为2011年7月22日和2015年12月3日，分类学命名分别为Bacillus licheniformis和Bacillus cereus。

三株菌株均具有耐盐特性，可在盐度为3～5％(w/v)的液体环境中生长，其中，仙河盐单胞菌、地衣芽孢杆菌及蜡样芽孢杆菌分别可分别利用PAHs(菲、蒽或荧蒽)、烷烃(C16～C24)及脂肪酸(棕榈酸、硬脂酸)作为唯一碳源进行生长代谢。

所述菌剂由仙河盐单胞菌、地衣芽孢杆菌及蜡样芽孢杆菌分别发酵混合后经载体固定化获得。

所述仙河盐单胞菌、地衣芽孢杆菌与蜡样芽孢杆菌菌悬液按照2～3:5～6:1(v:v)的比例混合并经固定得初始混合菌剂；

所述仙河盐单胞菌、地衣芽孢杆菌与蜡样芽孢杆菌菌悬液按照1:3～5:2～3(v:v)的比例混合并经固定化得补强混合菌剂。

一种适用于电动-微生物协同修复高盐度石油烃污染土壤中混合菌剂的应用，所述菌剂在与电场协同作用下对高盐度石油烃污染土壤修复的应用。

所述仙河盐单胞菌、地衣芽孢杆菌与蜡样芽孢杆菌菌悬液按照2～3:5～6:1(v:v)的比例混合并经固定得初始混合菌剂；