[发明专利]一种(R)-1-(2-三氟甲基苯基)乙醇的生物制备方法

权利要求书

1.一种(R)-1-(2-三氟甲基苯基)乙醇的生物催化制备方法，其特征在于所述方法为：以白地霉(Geotrichum candidum)ZJPH1704经发酵培养获得的湿菌体为生物催化剂，以2-三氟甲基苯乙酮为底物，以甘油为辅助底物，在pH 5.8～8.0的磷酸缓冲液中，于25～40℃、200rpm条件下进行生物还原反应，反应结束后，将反应液分离纯化，获得(R)-1-(2-三氟甲基苯基)乙醇；所述白地霉(Geotrichum candidum)ZJPH1704，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号：CCTCC NO：M 2017380，保藏日期为：2017年6月26日，保藏地址为中国武汉，武汉大学，邮编430072。

2.如权利要求1所述(R)-1-(2-三氟甲基苯基)乙醇的生物催化制备方法，其特征在于所述底物用量以缓冲液体积计为5～25mmol/L，湿菌体用量以缓冲液体积计为100～500g/L；辅助底物用量以缓冲液体积计分别为20g/L、40g/L、70g/L、100g/L、150g/L或200g/L。

3.如权利要求1所述(R)-1-(2-三氟甲基苯基)乙醇的生物催化制备方法，其特征在于所述生物催化剂按如下方法制备：(1)斜面培养：将白地霉ZJPH1704接种至斜面培养基，25～30℃培养1-2天，获得斜面菌种；斜面培养基终浓度组成为：葡萄糖15g/L，蛋白胨5g/L，酵母膏5g/L，K₂HPO₄ 0.5g/L，KH₂PO₄ 0.5g/L，MgSO₄·7H₂O 0.5g/L，NaCl 1g/L，(NH₄)₂SO₄ 1g/L，琼脂20g/L，溶剂为蒸馏水，pH 7.0；

(2)种子培养：将斜面菌种接种至种子培养基中，25～30℃、150～250rpm培养10～24h，获得种子液；种子培养基终浓度组成为：葡萄糖15g/L，蛋白胨5g/L，酵母膏5g/L，K₂HPO₄0.5g/L，KH₂PO₄ 0.5g/L，MgSO₄·7H₂O 0.5g/L，NaCl 1g/L，(NH₄)₂SO₄ 1g/L，溶剂为蒸馏水，pH 7.0；

(3)发酵培养：将种子液以体积浓度为4～10％的接种量接种至发酵培养基中，装液量为100mL/250mL摇瓶，25～30℃、150～250rpm培养24～28h，发酵结束后，将发酵液离心，收集湿菌体，即为生物催化剂；所述发酵培养基终浓度组成为：葡萄糖15g/L，蛋白胨5g/L，酵母膏5g/L，KH₂PO₄ 0.5g/L，(NH₄)₂SO₄ 1g/L，K₂HPO₄ 0.5g/L，NaCl 1g/L，MgSO₄·7H₂O 0.5g/L，溶剂为蒸馏水，pH 7.0。