[发明专利]一种犬MSC外泌体制剂及其制备方法在审
申请号: | 201711449491.8 | 申请日: | 2017-12-27 |
公开(公告)号: | CN108143748A | 公开(公告)日: | 2018-06-12 |
发明(设计)人: | 王丙云;詹小舒;罗东章;李东升;陈志胜;陈胜锋;罗兆益 | 申请(专利权)人: | 佛山科学技术学院;广东维赛生物科技有限公司 |
主分类号: | A61K35/28 | 分类号: | A61K35/28;A61P17/02;A61P29/00;C12N5/0775 |
代理公司: | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人: | 谢泳祥 |
地址: | 528000 广东省佛山市*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 制备 体制剂 种犬 毒副作用 皮肤伤口 皮肤损伤 实验模型 损伤组织 胎牛血清 体内循环 治疗效果 瘢痕形成 体积小 可用 伤口 体能 注射 体内 保证 修复 合并 治疗 开发 | ||
1.一种犬MSC外泌体制剂的制备方法,包括步骤:
1)无外泌体胎牛血清的制备:
用0.22um的滤膜过滤胎牛血清,滤液置于超高速离心管中,4℃,120000g超高速离心90min,收集上清液;
2)犬MSC来源外泌体的分离:
用10%无外泌体胎牛血清、1%双抗、1%L-谷氨酰胺和88%DMEM基础培养基配制完全培养基,以制得的完全培养基传代培养犬MSC,取第3-5代收集上清在4℃,300g离心10min除去死细胞;收集上清后在4℃,16500g离心20min除去细胞碎片;收集上清后用0.22um的滤膜过滤;收集上清后在4℃,120000g超高速离心90min;去上清后,用生理盐水重悬沉淀,再次以4℃,120000g超高速离心90min;去上清后,用生理盐水重悬沉淀,收集悬液即为犬MSC外泌体制剂。
2.根据权利要求1所述的犬MSC外泌体制剂的制备方法,其特征在于,步骤1)收集的上清液还需于超净工作台中用0.22um的滤膜过滤除菌。
3.根据权利要求1所述的犬MSC外泌体制剂的制备方法,其特征在于,制得的犬MSC外泌体制剂保存于-80℃冰箱中。
4.根据权利要求1~3任一项所述的制备方法所获得的犬MSC外泌体制剂。
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