[发明专利]一种灵芝孢子油的制备方法

说明书

本发明公开了一种灵芝孢子油的制备方法，以未破壁的灵芝孢子粉为原料，通过萌发、酶解、超声波冻融后萃取得到灵芝孢子油，破壁率达到96%以上。本发明在破壁前通过对灵芝孢子粉进行萌发处理，并配合三次冻融循环，使得灵芝孢子油中的有效成分得到最大保留，从而提高了灵芝孢子粉的破壁率和出油率，本发明所提供的方法工艺简单、成本低、提取率高、产品质量稳定、适合工业生产。

技术领域

本发明属于植物药有效成分提取技术领域，特别是涉及一种灵芝孢子油的制备方法。

背景技术

灵芝是我国传统扶正固本、滋补强壮的名贵中药，在我国有5000多年的药用、食用历史。灵芝孢子油是灵芝孢子粉破壁后提取的活性成分，为黄色透明液体，主要成份是灵芝酸、不饱和脂肪酸、灵芝多糖等。诱导或促进巨噬细胞的吞噬作用直接和间接毒杀肿瘤细胞。本品能够提高机体免疫力，减少因放、化疗引起的精神不佳、食欲减退、呕吐、脱发等情况的发生。作为保健品具有良好的功效，

灵芝孢子油的提取方法有传统的溶剂提取法，由于存在提取效率低、能耗高、费时长等缺点，现有采用超临界CO2萃取法的报道和专利申请较多，如CN1883590A、CN106318611A等，与传统方法相比，有生产周期短、有效成分不易破坏，无溶剂残留、不污染环境等优点。尽管如此，超临界CO2萃取法萃取灵芝孢子油需要的较高地压力和较长的提取时间，而且提取收率不稳定，批与批之间收率有较大的误差等缺点。

本发明旨在需求一种灵芝孢子粉高破壁率和高出油率的提取方法，更加适合工业生产。

发明内容

本发明的目的在于提供一种灵芝孢子油的制备方法，在破壁前通过对灵芝孢子粉进行萌发处理，提高了灵芝孢子粉的破壁率和出油率，提取工艺简单、优化了提取条件，降低了提取成本。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种灵芝孢子油的制备方法，以未破壁的灵芝孢子粉为原料，通过萌发、酶解、超声波冻融后萃取得到灵芝孢子油，破壁率达到80％以上。

一种灵芝孢子油制备方法，包括以下步骤：

(1)取未破壁灵芝孢子粉加入纯化水配成0.1g/mL的悬浊液60mL，然后向悬浊液中加入重量份数为 25％-30％的子实体浸出液，萌发18-24h；

(2)向步骤(1)所得悬浊液中依次加入重量份数为0.2％-0.5％纤维素酶、0.01％-0.05％的中性蛋白酶和0.15％-0.25％的木瓜蛋白酶，震荡摇匀，于60℃烘箱中培养0.5-1h(优选于60℃烘箱中培养0.8h)；

(3)将步骤(2)培养后的液体经超声震荡处理20-40min，使孢子团充分打散，于600-1000W下，经超声破碎仪破碎0.5-1h，然后于－20℃冷冻1.5h，转至微波炉中解冻4min，如此反复冻融循环3次；

(4)将步骤(3)处理后的液体移入分液漏斗，加入15-20mL无水乙醇、20-30mL的石油醚，振荡1min，收集有机层于已称重的三角瓶中，于55-75℃恒温水浴使有机溶剂挥发45min，然后于50℃下真空干燥至恒重，收集孢子油即可。

上述一种灵芝孢子油的制备方法，优选的方案是，步骤(1)加入重量份数为28％的子实体浸出液。

上述一种灵芝孢子油的制备方法，优选的方案是，步骤(1)萌发21h。

上述一种灵芝孢子油的制备方法，优选的方案是，步骤(2)加入重量份数为0.35％纤维素酶、0.03％的中性蛋白酶和0.2％的木瓜蛋白酶。

上述一种灵芝孢子油的制备方法，优选的方案是，步骤(3)经超声破碎仪破碎0.8h。

上述一种灵芝孢子油的制备方法，优选的方案是，步骤(4)加入18mL无水乙醇、25mL的石油醚。