[发明专利]人类Y精子的筛选方法在审

专利信息
申请号: 201810157258.0 申请日: 2018-02-24
公开(公告)号: CN108531445A 公开(公告)日: 2018-09-14
发明(设计)人: 山下直树;中田久美子 申请(专利权)人: 山下直树
主分类号: C12N5/076 分类号: C12N5/076
代理公司: 北京市金杜律师事务所 11256 代理人: 杨宏军
地址: 日本神*** 国省代码: 日本;JP
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摘要:
搜索关键词: 筛选 精子 聚乙烯吡咯烷酮 透明质酸酶 精子尾部 人类精子 弯曲状态 尾部弯曲 孕酮 损伤 检测
【说明书】:

本发明涉及人类Y精子的筛选方法。本发明的课题在于,提供对精子造成的损伤少、且可比较简便地对Y精子进行筛选的方法等。本发明的解决手段为:测定人类精子在含有透明质酸酶、孕酮及聚乙烯吡咯烷酮的生理性水溶液中的运动速度,检测该精子尾部的弯曲状态,筛选运动速度更快、且尾部弯曲程度低、尾部鞭打频率小的精子作为Y精子。

技术领域

本发明涉及人类Y精子的筛选方法(以下有时也称为“本申请的筛选方法”)、人类Y精子的筛选用试剂盒(以下有时也称为“本申请的筛选用试剂盒”),所述人类Y精子的筛选方法包括测定人类精子在含有透明质酸酶(Hyaluronidase)、孕酮(progesterone)(也称为“黄体激素”)及聚乙烯吡咯烷酮(PVP;Polyvinylpyrrolidone)这三种成分(以下有时也称为“本申请的三种成分”)的生理性水溶液(以下有时也称为“本申请的生理性水溶液”)中的直线前进速度(日语为“直進速度”)的工序和检测该精子的尾部的弯曲状态的工序,所述人类Y精子的筛选用试剂盒包含本申请的生理性水溶液。

背景技术

人类等哺乳动物的性别是由来自父本和母本的两种性染色体(X染色体及Y染色体)的组合决定的。女性的配子即卵子均具有X染色体,而男性的配子即精子存在具有X染色体的精子(X精子)和具有Y染色体的精子(Y精子)这2种。因此,若X精子与卵子进行授精,则出生XX型(纯合型)的女婴,若Y精子与卵子进行授精,则出生XY型(杂合型)的男婴。

不仅在日本,在其他国家期望生育男婴的情况也并不少见。作为从精子中筛选Y精子的方法,报道了例如基于X精子和Y精子的移动速度及生存时间的差异的方法、基于阴道内pH差异的方法、基于比重差异的方法、无载体电泳法、使用了单克隆Y抗体的方法等。然而,这些方法的有用性并未得到确认。另外,使用流式细胞术对X精子和Y精子进行筛选的方法是已知的。虽然该方法的有用性得到了确认,但在所使用的激光的安全性、由DNA结合色素所导致的染色体异常、DNA合成能力的降低、细胞周期的延迟等而对精子造成损伤方面存在问题。此外,还报道了如下方法:对精子照射光,并对透过精子的光的光谱、被精子反射的光的光谱进行分析,由此在不对精子造成损伤的状态下筛选Y精子(专利文献1)。然而,该文献中并未就筛选出Y精子的情况进行具体的公开。

现有技术文献

专利文献

专利文献1:日本特开2004-101323号公报

发明内容

发明所要解决的课题

本发明的课题在于,提供对精子造成的损伤少、且可比较简便地对Y精子进行筛选的方法等。

用于解决课题的手段

为了解决上述课题,本申请发明人持续进行了深入研究。在此过程中,发现在测定人类精子在含有透明质酸酶、孕酮及PVP的生理性水溶液中的运动速度、并对该精子尾部的弯曲状态进行检测时,运动速度更快、且尾部弯曲程度低、尾部鞭打频率(日语为“尾部振動数”)小的精子是Y精子的概率高达大于90%,从而完成了本发明。

即,本发明如下所述。

[1]人类Y精子的筛选方法,其特征在于,测定人类精子在含有透明质酸酶、孕酮及聚乙烯吡咯烷酮的生理性水溶液中的运动速度,并检测所述精子的尾部的弯曲状态。

[2]如上述[1]所述的筛选方法,其特征在于,进一步测定人类精子的头部的大小。

[3]如上述[1]或[2]所述的筛选方法,其特征在于,运动速度包括直线速度。

[4]用于人类Y精子的筛选的试剂盒,其特征在于,包含含有透明质酸酶、孕酮及聚乙烯吡咯烷酮的生理性水溶液。

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