[发明专利]一种识别氨基酸及肽类化合物绝对构型和光学纯度的方法

权利要求书

1.一种识别氨基酸及肽类化合物绝对构型和光学纯度的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)衍生化：将待测氨基酸样品或肽类化合物样品溶于碱性甲醇溶液中，加入邻苯二甲醛固体或其甲醇溶液，振摇，得待测氨基酸或肽类化合物样品的衍生化产物；

(2)采集电子圆二色谱：通过电子圆二色谱仪采集待测氨基酸或肽类化合物样品衍生化产物的电子圆二色谱；

(3)构型确定：将待测氨基酸样品衍生化产物的电子圆二色谱与标准氨基酸衍生化产物的电子圆二色谱进行比较，确定待测氨基酸样品的绝对构型；

(4)光学纯度确定：建立对映体过量与特定波长下各向异性因子的标准曲线，确定其光学纯度；

其中所述氨基酸选自天然的或非天然的伯胺类手性氨基酸；

所述肽类化合物选自N端为裸露的伯胺类手性氨基酸的肽类化合物；

所述标准氨基酸衍生化产物的电子圆二色谱是由已知绝对构型的、与待测氨基酸或肽类化合物样品相同种类的氨基酸或肽类化合物，在相同的条件下进行衍生化反应并进行电子圆二色谱采集获得；

所述各向异性因子g因子为特定波长下电子圆二色谱信号强度与紫外吸收强度的比值；

所述电子圆二色谱仪的参数设置条件为：扫描波长220-400nm，扫描速度100nm/min，数据间隔0.5nm，带宽1nm，样品池为0.1cm。

2.根据权利要求1所述的识别氨基酸及肽类化合物绝对构型和光学纯度的方法，其特征在于，所述天然氨基酸选自丙氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、天冬酰胺、亮氨酸、丝氨酸、苏氨酸、缬氨酸、精氨酸、半胱氨酸、谷氨酰胺、酪氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸、异亮氨酸、蛋氨酸或组氨酸；

所述肽类化合物选自N端的氨基酸为丙氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、天冬酰胺、亮氨酸、丝氨酸、苏氨酸、缬氨酸、精氨酸、半胱氨酸、谷氨酰胺、酪氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸、异亮氨酸、蛋氨酸或组氨酸的肽类化合物。

3.根据权利要求1所述的识别氨基酸及肽类化合物绝对构型和光学纯度的方法，其特征在于，步骤(1)衍生化中所述的肽类化合物选自二肽、三肽、四肽、五肽、六肽。

4.根据权利要求1所述的识别氨基酸及肽类化合物绝对构型和光学纯度的方法，其特征在于：步骤(1)衍生化中所用的碱性甲醇溶液的碱性条件选自有机碱或无机碱。

5.根据权利要求4所述的识别氨基酸及肽类化合物绝对构型和光学纯度的方法，其特征在于，所述无机碱选自KOH、NaOH、LiOH、Na₂CO₃、NaHCO₃、K₂CO₃，所述有机碱选自DIEA和DBU。