[发明专利]功能分离的单细胞级直接共培养芯片及其使用及制备方法

权利要求书

1.一种功能分离的单细胞级直接共培养芯片的使用方法，所述芯片包括玻片层（A）和细胞共培养层（B）；所述细胞共培养层（B）包括进样口（1），共培养阵列区域（2）及出样口（4）；定义进样口（1）到出样口（4）之间距离的方向为长度方向，与之垂直的在方向为宽度方向；所述共培养阵列区域（2）由若干共培养结构（3）呈阵列排布而成；所述共培养结构（3）主要为一凸起的非闭合环状结构外壁（8），结构外壁（8）内部形成培养区域（5）；所述结构外壁（8）靠近进样口（1）的壁上有一空间U型区域，该区域靠近培养区域（5）侧有拦截定位微柱（9），靠近进样口（1）侧则形成细胞拦截区域（6）；所述结构外壁（8）靠近出样口（4）的壁上有另一缺口，该缺口区域有结构微柱（7）；

其特征在于，所述功能分离的单细胞级直接共培养芯片的使用方法包括以下步骤：

步骤一：从入口（1）加入生物相容性液体直至将腔体内的空气完全排出；

步骤二：从入口（1）加入细胞I悬液，细胞停留在拦截区域（6）；

步骤三：从入口（1）加入培养液或缓冲液，将未被捕获的细胞冲走；

步骤四：将芯片上下翻转，细胞在重力作用下下落，维持一定的进样速度，细胞进入培养区域；

步骤五：加入细胞Ⅱ，重复步骤一～步骤三即可实现细胞Ⅰ和细胞Ⅱ的共培养；

步骤六：加入细胞Ⅲ，重复步骤一～步骤三即可实现细胞Ⅰ、细胞Ⅱ和细胞Ⅲ的共培养以此类推通过一次步骤一～步骤三实现一种细胞的定位培养，重复步骤一～步骤三n次，实现n种细胞的共培养。