[发明专利]一种基于毛细管电泳的极性物质电动提取方法

说明书

本发明属于分析化学技术领域，具体涉及一种基于毛细管电泳的极性物质电动提取方法。通过在极酸性介质中，使复杂样品中的极性物质发生电离，并在外加电场的驱动下进入PEEK毛细管内，从而被分离提取。本发明操作过程简单快捷，为复杂样品中极性物质的分离分析提供了新的方法。

技术领域

本发明属于分析化学技术领域，具体涉及一种基于毛细管电泳的极性物质提取方法。

背景技术

毛细管区带电泳（capillary zone electrophoresis, CZE）是依靠带电离子的电荷密度（有效电荷与离子大小的比率）对其进行分离的。自由流电泳（Free FlowElectrophoresis, FFE）是一种无固体支持介质的制备型区带电泳模式。FFE是利用带电离子电泳淌度和等电点的不同对其进行分离，尤其适用于各类生物材料的分离和纯化。样品连续地注入由两片平板形成的分离腔后，随着单一或多种缓冲液形成的薄膜流经整个分离腔。在垂直于电解质和样品流动的方向上施加电压，可在溶液流动时施加电压，即连续自由流电泳；也可在溶液静止时施加电压，即间歇自由流电泳。外加的电压将使电泳淌度和等电点不同的各组分的运动方向发生不同角度的偏离，在分离室的末端从不同的出口流出。自由流电泳的特点在于可连续进样并能够大体积收集样品片段，可作为前处理与分离技术与其它色谱技术联用，或直接与检测仪器联用。文献曾报道，用FFE与超高分辨的ESI ICR-FT/MS离线联用对Suwannee River黄腐酸样品进行分离鉴定。毛细管等速电泳（CapillaryIsotachophoresis, cITP）也是利用分析物的有效淌度的不同进行分离的电泳技术。与CZE不同的是，cITP中使用两种电解质，而样品处于两种电解质之间：前导电解质（leadingelectrolyte）采用有效淌度比分析物的有效淌度大的缓冲液；尾随电解质（terminatingelectrolyte）采用有效淌度比分析物的有效淌度小的缓冲液。在外加电压的作用下，样品中速度最大的离子移动最快，但总落后于前导电解质；速度最小的离子移动最慢，但总领先于尾随电解质，因此样品离子便被压缩在前导电解质和尾随电解质之间进行分离，

本发明结合CZE、FFE与cITP的分离特点，建立一种新型毛细管电泳方法，用于提取复杂样品中的极性物质。在极酸性（pH=1.8）的介质中，只有能够电离的极性物质能够在外加电场的驱动下进入PEEK毛细管内，从而被分离提取。

发明内容

本发明目的在于建立一种新型毛细管电泳方法，用于提取复杂样品中的极性物质。该方法中，在极酸性（pH=1.8）的介质中，使复杂样品中的极性物质发生电离，并在外加电场的驱动下进入PEEK毛细管内，从而被分离提取。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种基于毛细管电泳的极性物质提取方法，其具体步骤为：

1) 运行液的配置：配置电动提取所需的运行液（pH 1.8）；

2) 毛细管的预处理：PEEK毛细管长度为60 cm，所有提取过程中，PEEK毛细管保持25℃的工作温度，未使用过的毛细管需使用前需用去离子水和甲醇分别冲洗，每次提取前后，也需用去离子水和甲醇分别冲洗；

3) 极性物质的提取：先采用压力进样的方式，使毛细管充满运行液，再采用电动进样的方式，对极性物质进行提取，最后用压力将毛细管内的样品推进采集瓶；

4）极性物质的检测：将毛细管中的样品直接推入质谱检测器，对其进行检测。

具体的：步骤1)所述运行液的配置具体为含极性物质的溶液。

步骤2)所述毛细管的预处理的配置具体操作为，未使用过的PEEK毛细管使用前用去离子水和甲醇分别冲洗10 min，重复五次，以确保毛细管内壁的清洁。每次提取前及提取结束，依次以去离子水及甲醇冲洗毛细管10 min，重复2次。每提取5次，依次以去离子水及甲醇冲洗毛细管5 min，重复2次。