[发明专利]一种用于早期非小细胞肺癌诊断的试剂盒

说明书

本发明提供了一种用于早期诊断非小细胞肺癌的试剂盒，该试剂盒的标志物为血清外泌体的蛋白，所述的外泌体蛋白为外泌体人胎球蛋白A即AHSG或/和外泌体细胞外基质蛋白‑1即ECM‑1。检测样品中标志物的含量；若样本中标志物的含量分别大于其临界值范围，则初步判断提供所述样品的样本存在较大的非小细胞肺癌风险；本试剂盒中的标志物提取简单，制备方便快捷，检测过程简单，对早期非小细胞肺癌有很好的诊断效果。

技术领域

本发明涉及一种基于外泌体蛋白AHSG、ECM-1的非小细胞肺癌诊断试剂盒研发，属于医疗卫生领域。

背景技术

非小细胞肺癌（Non-small cell lung cancer, 非小细胞肺癌）占所有肺癌的80%，约75%的患者在就诊时已出现远处转移，5年生存率仅2％。因此，现在迫切的需要一种较为灵敏的诊断标记物，为发生远处转移的非小细胞肺癌的早期诊断、早期治疗及预后判断提供客观依据。

肿瘤细胞来源的外泌体（Tomor-derived exosomes, TDEs）已经被证明可以促进癌症进展，由外泌体介导的细胞间相互作用可能在肿瘤的发生和远处转移中具有重要的作用。外泌体的分离及其在临床中的使用可替代侵入性手术以诊断或主要在非小细胞肺癌中的癌症患者的后续，其中在大多数患者中原发性肿瘤组织的可用性是困难的。此外，外泌体内容物如miRNAs，蛋白质等在外泌体膜的保护下免受酶的降解，TDEs易于在血液样本中获得。因此可以在循环血液中被稳定检测到，使其成为转移性非小细胞肺癌诊断的理想生物标志物。最近，肿瘤来源的外泌体（Tumor-derived exosomes，TDEs）已经被证明可以促进肿瘤的侵袭和转移。TDEs含有很多肿瘤相关蛋白，如表皮生长因子受体（EGFR），KRAS和RAB家族蛋白等。TDEs中含有蛋白质、脂类和核酸等成分。它可以参与细胞间的信息交换，从而调节肿瘤的生成、血管生成、侵袭和转移。

外泌体内的蛋白质主要包含其来源细胞的特异性蛋白，如APCs分泌的外泌体可表达MHC-Ⅰ和MHC-Ⅱ类分子、共刺激蛋白CD80等、四次跨膜蛋白（如CD9、CD63、CD81和CD82等）和内体运输分拣复合物（endosomal sorting complex required fortransport，ESCRT）；另外外泌体中还包含参与细胞间物质交换的蛋白，如Rab蛋白家族（如Rab27、Rab11和Rab35）和热休克蛋白（如Hsp60、Hsp70和Hsp90等），细胞特异性蛋白能够识别不同细胞来源的外泌体。外泌体蛋白可能反映疾病相关的病理过程。理论上，外泌体中蛋白质的含量要显著高于血液中游离的，因为外泌体蛋白质能受膜保护而免受蛋白酶依赖性降解，因此可以在循环血清和血清中稳定检测，使其成为许多临床应用的理想生物标志物。另外，TDEs取材简单，微创，能够反映肿瘤异质性，可动态监测肿瘤相关蛋白质的变化情况，或许可作为了潜在的肿瘤生物标志物。目前尚未发现关于蛋白质在转移性非小细胞肺癌外泌体中的表达水平的报道。

发明内容

针对上述问题及现状，本发明提供了一种用于早期诊断非小细胞肺癌的试剂盒，该试剂盒的标志物提取简单，诊断结果准确。

一种用于早期诊断非小细胞肺癌的标志物，为血清外泌体的蛋白。

所述的外泌体蛋白为外泌体人胎球蛋白A 即AHSG或/和外泌体细胞外基质蛋白-1即ECM-1。

优选地，一种用于早期诊断非小细胞肺癌的标志物，为AHSG和ECM-1联合癌胚抗原即CEA。

一种用于早期诊断非小细胞肺癌的试剂盒，所述检测方法如下：

检测样品中标志物的含量；若样本中标志物的含量分别大于其临界值范围，则初步判断提供所述样品的样本存在较大的非小细胞肺癌风险；

所述样品为血液样品。

所述临界值范围为正常人的含量范围或良性肿瘤及炎性病人的含量范围。