[发明专利]大豆叶黄豆黄苷的提取纯化方法及其用途

说明书

大豆叶黄豆黄苷的提取纯化方法及其用途。属于黄豆黄苷技术领域。本发明方法步骤：(1)、将干燥的大豆叶粉碎，过筛，加入去离子水，浸泡；步骤(2)、超声提取，再加热萃取，离心除去固形物，获得上清液；步骤(3)、用石油醚和去离子水进行分液萃取，萃取后水层再次用乙酸乙酯分液萃取，得乙酸乙酯提取物；步骤(4)、乙酸乙酯提取物经硅胶色谱分离纯化，以石油醚‑乙酸乙酯梯度洗脱，经硅胶薄层色谱检测后合并，经高效液相色谱检测，即得。本发明产品用于制备降血脂、降血糖药品的应用。

技术领域

本发明属于黄豆黄苷的技术领域；具体涉及农作物大豆叶黄豆黄苷的提取纯化方法及其用途。

背景技术

随着人们生活水平的提高和健康意识的增强，来源于植物的活性因子因其对人类健康具有促进作用而需求逐年增大。此类活性因子无毒副作用，对人体生理代谢以调节为主，受到各国学者的瞩目，其开发利用具有广阔的市场前景。大豆异黄酮是大豆生长过程中形成的一类次级代谢产物，是一类具有生物活性的黄酮类化合物。大豆异黄酮具有与雌激素相似的结构，又被称为植物雌激素。大豆异黄酮的雌激素作用影响到激素分泌、代谢生物学活性、蛋白质合成、生长因子活性等，是植物来源的天然抗癌及预防癌症因子。黄豆黄苷是大豆异黄酮的一种糖苷型化合物，在大豆胚芽中含量较高，约占异黄酮总量的40％。文献表明，黄豆黄苷的提取工艺及其健康功效研究报道较少，导致黄豆黄苷的开发利用受到限制。

我国大豆资源丰富，种植面积广泛，因此大豆及其副产物的研制开发具有很大的发展潜力。资料显示，大豆收获后的大豆茎叶在我国的利用率较低，一部分被用作饲料原料，尚不到总产量的30％，大部分被废弃在田间地头，既造成了资源浪费，又导致环境被污染。因此，对大豆叶进行合理利用进而创造价值，具有深远的社会意义。大豆籽实中大豆异黄酮的提取工艺研究已有大量报道，但是大豆叶中大豆异黄酮的提取尤其是单一化合物的提取纯化及其功效研究罕见报道。

发明内容

本发明提供了从大豆叶提取纯化黄豆黄苷的方法，大豆叶黄豆黄苷具有良好的降血脂、降血糖功效。

为解决以上技术问题，本发明通过以下技术方案实现：大豆叶黄豆黄苷的提取纯化方法是按以下步骤进行的：

步骤(1)、将干燥的大豆叶粉碎，过筛，加入10倍重量的去离子水，浸泡至少24h；

步骤(2)、然后超声提取至少20min，再加热萃取，离心除去固形物，获得上清液；

步骤(3)、步骤(2)获取的上清液用石油醚和去离子水进行分液萃取，萃取后水层再次用乙酸乙酯分液萃取，得乙酸乙酯提取物；

步骤(4)、乙酸乙酯提取物经硅胶色谱分离纯化，以石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，经硅胶薄层色谱检测后合并，经高效液相色谱检测，即得。

进一步地限定，步骤(1)中过60目～80目筛。

进一步地限定，骤(2)中超声提取功率为100～200W。

进一步地限定，步骤(2)所述萃取温度为50℃～80℃，萃取时间为1～2h。

进一步地限定，步骤(2)所述离心转速为1000rpm。

进一步地限定，步骤(3)中石油醚和去离子水的体积比为1:1。

进一步地限定，步骤(3)中水层与乙酸乙酯的体积比为1:1。

进一步地限定，步骤(4)中石油醚/乙酸乙酯按体积比为(4:1→3:1→2:1→1:1)进行梯度洗脱。

大豆叶黄豆黄苷用于制备降血脂、降血糖药品的应用。

本发明的有益效果：

(1)提高大豆茎叶的利用率；

(2)产品纯度高，纯度高达99.9％；