[发明专利]一种抗肿瘤药物的快速药敏检测方法

说明书

本发明涉及一种抗肿瘤药物的快速药敏检测方法，其包括将肿瘤组织和/或细胞接种到小鼠肾包膜中，其中所述小鼠为免疫缺陷小鼠或裸小鼠，优选为生长抑素基因敲除的免疫缺陷小鼠；给予所述小鼠测试肿瘤药物，一定时间后处死小鼠取出肿瘤组织通过观测肿瘤细胞坏死率和/或肿瘤细胞Ki67蛋白表达量判定药物敏感性。本发明所述方法可以快速准确提供药敏结果，为临床实现肿瘤个性化治疗提供可能。本发明方法也可以用于异种移植肿瘤动物模型制备及抗肿瘤药物筛选。

发明领域

本发明涉及一种抗肿瘤药物的快速药敏检测方法。更具体地说，本发明涉及肿瘤组织和/或细胞异种移植小鼠模型的建立及其药敏检测方法。本发明方法也可以用于抗肿瘤药物筛选。

背景技术

近年来，恶性肿瘤已成为全球人类头号杀手，尽管在肿瘤的基础研究、转化医学及临床研究等方面取得了不少成绩，但是多数抗肿瘤化疗药物的疗效并不尽人意，化疗有效率仅25-30%，同时引起患者极大的毒副反应，威胁患者生命。因此，如何开展肿瘤个体化精准诊疗，为各个患者筛选合适的治疗药物和/或方案，提高治疗有效率是临床上亟待解决的问题。

目前抗肿瘤新药研发及临床化疗选择常基于肿瘤细胞体外培养药敏测试、基因检测及传代肿瘤细胞移植的体内模型（cell line-derived xenografts，CDX）等，具有一定的研究和临床价值，但是并不能真正反映临床个体对于治疗药物的敏感性，故临床疗效预测性较差，无临床实用性。目前应用于抗肿瘤药物检测最好的技术是人源性肿瘤组织异种移植模型（patient-derived tumor xenograft models，PDTX），是将来自患者的新鲜肿瘤组织以组织块的形式接种到免疫缺陷小鼠体内，其在基因组层面、蛋白组层面及组织形态学层面保留了患者肿瘤分子生物学特征，保持了与病人肿瘤相似的遗传特性和肿瘤异质性。然而，目前传统PDTX模型应用于药物筛选的方法具有建模和药效检测时间长等缺点，主要原因是传统PDTX药敏评价方法主要基于肿瘤体积的测定，因为肿瘤生长到可测量体积的时间较长（至少为2个月），例如原代移植加上药敏检测时间需要2-6个月，且建模成本高昂，这也限制了PDTX的发展与应用。

因此，为了适应临床肿瘤个体化精准诊疗和药物筛选的需要，亟需一种快速准确的药敏检测方法，包括改进的PDTX建模方法与新的药敏评价方法，其能够降低建模和药敏检测时间，降低成本，在保证肿瘤异质性与建模成功率的同时利于推广应用。

发明内容

本发明提供一种新的抗肿瘤药物快速药敏检测方法（下文简称SuperPDTX），其包括提供肿瘤组织和/或细胞。所述肿瘤组织和/或细胞可以来源于人或者非人动物，所述非人动物例如小鼠、大鼠、牛、羊、猿猴等。所述肿瘤组织和/或细胞优选为来自肿瘤病人。对取自肿瘤病人的肿瘤组织进行常规处理，例如机械除去除结缔组织、脂肪组织和肿瘤坏死组织等；然后将肿瘤组织适当剪碎，例如制成约0.5×0.5×1mm³至约2×2×3mm³大小的组织块，优选为约1×1×2mm³大小的组织块。

在本发明中，术语“肿瘤”是指任何来源的任何组织/细胞类型的恶性肿瘤和癌症，包括但不限于胃癌、结肠癌、直肠癌、食管癌、口腔癌、骨肉瘤、前列腺癌、乳腺癌、脑部肿瘤（例如神经胶质瘤）、白血病、神经内分泌肿瘤、肝癌、肾癌、胰腺癌、肺癌、黑素瘤、多发性骨髓瘤、卵巢癌、宫颈癌、结肠直肠癌、软组织肉瘤、皮肤癌、甲状腺癌、淋巴癌等。