[发明专利]培养蜂毒肽重组质粒的枯草芽孢杆菌感受态细胞的培养基在审
申请号: | 201811008296.6 | 申请日: | 2018-08-31 |
公开(公告)号: | CN110872565A | 公开(公告)日: | 2020-03-10 |
发明(设计)人: | 杨金龙;戴茜茜;罗文华;曹兰;姬聪慧;任勤 | 申请(专利权)人: | 重庆市畜牧科学院 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12R1/125 |
代理公司: | 重庆弘旭专利代理有限责任公司 50209 | 代理人: | 石欢欢 |
地址: | 402460 *** | 国省代码: | 重庆;50 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 培养 蜂毒 重组 质粒 枯草 芽孢 杆菌 感受态 细胞 培养基 | ||
1.培养枯草芽孢杆菌感受态细胞的培养基,其特征在于,包括A和B,A由以下成分组成:硫酸铵0.2%,七水硫酸镁0.018%,酵母膏0.2%,葡萄糖0.5%,磷酸氢二钾1.4%,磷酸二氢钾0.6%,硫酸铵0.2%,柠檬酸三钠0.1%,溶剂为水,以质量百分比计,且A与B的体积比为1:10。
2.根据权利要求1所述的培养基,其特征在于,B由以下成分组成:硫酸铵0.2%,七水硫酸镁0.084%,酵母膏0.1%,葡萄糖0.5%,磷酸氢二钾1.4%,磷酸二氢钾0.6%,硫酸铵0.2%,柠檬酸三钠0.1%,氯化钙0.1mol/L,溶剂为水,以质量百分比计。
3.权利要求1或2所述培养基的培养方法,其特征在于,包括以下步骤:
将枯草芽孢杆菌活化后,挑单菌落接种于A中,恒温水浴振荡培养,取菌液接种于B中,在恒温水浴振荡器中继续培养,离心收集菌体沉淀;取上清液重悬菌体沉淀,此时枯草芽孢杆菌处于感受状态。
4.根据权利要求3所述的培养方法,其特征在于,所述恒温水浴振荡培养的温度为37℃,培养时间为2h。
5.根据权利要求3或4所述的培养方法,其特征在于,所述恒温水浴振荡的转速为180转/min。
6.根据权利要求3、4或5所述的培养方法,其特征在于,所述离心转速为8000×g。
7.根据权利要求3、4、5或6所述的培养方法,其特征在于,所述继续培养的温度为37℃,时间为90min。
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