[发明专利]DNA编码碎片分子库的合成方法和连接基团的筛选方法

权利要求书

1.一种DNA编码碎片分子库的合成方法，其特征在于，提供A链、B链、C链；

所述A链含有n1序列、非编码区NC且所述A链连接有三叉结构基团，所述三叉结构基团的每个叉上具有官能团，每个所述官能团携带有保护基；所述官能团为巯基；所述保护基为叔丁基硫基﹑三苯甲基﹑苯甲酰基；

所述B链含有n2序列，所述n2序列为R₂结构基团的标签；

所述C链含有n3序列，所述n3序列为R₃结构基团的标签；

采用“分组-合并-分组”的合成方式，获得具有R₁、R₂和R₃结构基团的A₅链，且所述n1序列为R₁结构基团的标签。

2.如权利要求1所述的DNA编码碎片分子库的合成方法，其特征在于，所述“分组-合并-分组”的合成方式包括以下步骤：

将具有R₁结构基团的化合物与A链进行反应，使所述R₁结构基团与其中一个所述官能团发生反应，获得具有R₁结构基团的A₁链；

采用DNA连接酶将A₁链与B链连接，获得A₂链；

将具有R₂结构基团的化合物与A₂链进行反应，使所述R₂结构基团与其中一个所述官能团发生反应，获得具有R₁和R₂结构基团的A₃链；

采用DNA连接酶将A₃链与C链连接，获得A₄链；

将具有R₃结构基团的化合物与所述A₄链反应，使所述R₃结构基团与其中剩余的所述官能团发生反应，获得具有R₁、R₂和R₃结构基团的A₅链。

3.一种连接基团的筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：

提供如权利要求1～2任一项所述的合成方法合成的DNA编码碎片分子库；

提供具有n4序列的D链，所述D链修饰一个具有三叉结构的连接基团L，所述D链的非编码区NCr与所述DNA编码碎片分子库中的非编码区NC的碱基互补；

将所述DNA编码碎片分子库与固载的靶点蛋白进行孵育，洗脱掉与靶点蛋白没有亲和力或者亲和力较弱的DNA编码碎片分子库，获得与靶点蛋白有较强亲和力的DNA编码碎片分子库化合物；

将所述D链与所述与靶点蛋白有较强亲和力的DNA编码碎片分子库化合物混合并孵育，使所述D链非编码区NCr的DNA与所述与靶点蛋白有较强亲和力的DNA编码碎片分子库化合物携带的非编码区NC的DNA耦合，同时所述化合物中的3个碎片分子转移至所述连接基团L上，并向其中加入DNA聚合酶，使所述D链的DNA发生延展，以复制3个碎片分子对应的n1、n2、n3序列，获得具有三个碎片分子和连接基团L且被n1、n2、n3、n4序列编码的双链DNA。

4.如权利要求3所述的连接基团的筛选方法，其特征在于，还包括对所述的双链DNA进行PCR扩增、测序，识别所述靶点蛋白特异结合的碎片组合及连接基团L。

5.如权利要求3所述的连接基团的筛选方法，其特征在于，所述连接基团L的三叉结构为三叉氨基结构。